申请/专利权人：浙江省农业科学院

申请日：2023-11-01

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN117701669A

主分类号：C12Q1/06

分类号：C12Q1/06;C12Q1/6869;C12R1/01

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.02#实质审查的生效;2024.03.15#公开

摘要：本发明公开了一种食品表面菌群绝对定量的方法。该方法结合16SrDNA扩增子测序技术与内标法，克服了16SrDNA扩增子测序技术只能测量相对含量，不能进行定量测量的缺陷。本发明使用迟缓爱德华氏菌作为内标菌，可以减少实验误差，准确地测量样品中各菌属绝对含量。

主权项：1.一种食品表面菌群绝对定量的方法，其特征在于，包括以下步骤；1将一系列食品样品中的一份加入至缓冲蛋白胨水中拍打震荡1-5min，并取出一定体积离心；取上清液再次离心；弃上清液，加入无菌水，震荡至沉淀溶解，然后分为等体积的第一待测液、第二待测液和第三待测液；2用血球板计数法计算步骤1所得第一待测液中的细菌数量；3重复步骤1的方法处理该系列食品样品中的剩余样品；4分别向各样品的第二待测液中加入内标菌悬液，内标菌悬液所含内标菌的数量为步骤2所得细菌数量的1-20％；向第三待测液中加入与内标菌悬液等体积的PBS；5使用细菌基因组DNA提取试剂盒分别提取各样品第二待测液和第三待测液的DNA，再用16SrDNA扩增子测序法分别得到各样品第二待测液和第三待测液中各菌属的相对丰度；6根据各样品第二待测液所添加的内标菌数量、步骤5所得第二待测液中内标菌相对丰度，计算得到每克食品中所含细菌总量；再根据各样品第三待测液中各菌属的相对丰度，计算得到各菌属的绝对含量。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江省农业科学院 一种食品表面菌群绝对定量的方法

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