申请/专利权人：贵州医科大学

申请日：2022-03-24

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN114672454B

主分类号：C12N5/077

分类号：C12N5/077

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.15#授权;2022.08.05#实质审查的生效;2022.06.28#公开

摘要：使用原代心肌细胞构建心肌缺血再灌注胰岛素抵抗模型的构建方法，从SD新生乳鼠获取原代心肌细胞，通过氧糖剥夺后复氧的实验方法模拟在体心肌缺血再灌注实验模型。此模型经济成本低，实验周期短，干扰因素少，直接反应器官组织的病理生理变化，相比动物模型具有更好的稳定性。

主权项：1.一种使用原代心肌细胞构建心肌缺血再灌注胰岛素抵抗模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤：（1）原代心肌细胞的培养：取SD大鼠，在无菌环境条件下开胸获取心脏；PBS液清洗心脏，剪碎心肌至1mm3大小的组织块，使用胰蛋白酶浸泡软化组织，使用含EDTA胰蛋白酶消化4-6次，直至组织块基本消化完全，使用完全培养基中和胰酶，细胞网筛过滤后，收集细胞悬液接种于培养皿中，差速贴壁法去除心肌成纤维细胞，所得的含原代心肌细胞悬液于培养皿中培养，同时每皿加入5-溴脱尿苷以抑制成纤维细胞生长；（2）造模：原代心肌细胞培养48h后，更换为含血清的低糖DMEM培养基培养，在37℃含氧气浓度小于等于1%的缺氧条件的培养箱中以无糖培养基培养，后迅速更换为含血清的低糖DMEM培养基在37℃含5%CO2的复氧条件培养箱中培养，缺氧条件时间为4h，复氧条件时间为15-30min，得到心肌缺血再灌注胰岛素抵抗模型。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 贵州医科大学 使用原代心肌细胞构建心肌缺血再灌注胰岛素抵抗模型的构建方法

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