申请/专利权人:广州万孚生物技术股份有限公司
申请日:2021-11-22
公开(公告)日:2024-03-15
公开(公告)号:CN114252594B
主分类号:G01N33/543
分类号:G01N33/543;G01N33/535;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/68
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.03.15#授权;2022.04.15#实质审查的生效;2022.03.29#公开
摘要:本发明涉及一种胎盘生长因子检测试剂盒及其制备方法与应用,发明人采用双抗体夹心法联合磁微粒化学发光技术对胎盘生长因子进行检测,并发现采用发明人优化后的免疫微磁粒制备方法,制备得到的胎盘生长因子捕获抗体磁微粒与发明人进一步通过特定比例交联剂SPDP、DTT和封闭剂MMTS制备得到的碱性磷酸酶标记的胎盘生长因子检测抗体,所形成的一种胎盘生长因子化学发光免疫检测试剂盒,能以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具,自动完成检测,同时其检测性能还显著提高,检测灵敏度达到0.54pgmL,检测线性范围宽,能达到3pgmL~10000pgmL。预示其具有广阔的检测应用前景。
主权项:1.一种胎盘生长因子化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,包括胎盘生长因子捕获抗体磁微粒和化学发光标记物标记的胎盘生长因子检测抗体;所述胎盘生长因子捕获抗体磁微粒的制备步骤包括:(1)预处理:磁微粒经预处理,得到混合液1,所述磁微粒采用甲苯磺酰基修饰;(2)活化:利用交联剂对抗体进行活化处理,所述交联剂为BSPEG5,所述抗体为胎盘生长因子单克隆抗体,所述抗体与交联剂使用的质量比为103:(0.5~2.0);(3)偶联:将步骤(2)活化后的抗体加入步骤(1)得到的混合液1中,得到混合液2,经孵育,得到抗体-磁珠偶联物;(4)封闭:在所述步骤(3)得到的抗体-磁珠偶联物中加入封闭液进行封闭,得到抗体-磁珠偶联的免疫磁微粒终产物;所述化学发光标记物标记的胎盘生长因子检测抗体为DTT活化后的化学发光物和交联剂活化后的胎盘生长因子检测抗体经混合交联、封闭剂处理后得到;所述交联剂选自SPDP、DTBP、DTSSP中的任意一种,所述胎盘生长因子检测抗体与交联剂的质量比为100:(0.5~2.0);所述封闭剂为MMTS;所述化学发光标记物为碱性磷酸酶。
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