申请/专利权人：江南大学

申请日：2023-12-19

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN117723521A

主分类号：G01N21/64

分类号：G01N21/64

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.05#实质审查的生效;2024.03.19#公开

摘要：本发明涉及一种基于金属荧光增强效应检测线粒体内一氧化氮的比率荧光方法，属于生物分析检测技术领域。本发明设计制备了NO响应探针pNO520和GNP，二者通过带有荧光基团的dsDNA连接，最后将具有靶向线粒体功能的靶向肽修饰到GNP表面形成生物传感器Mito‑GNP‑pNO520。在NO存在的有氧条件下，通过pNO520与NO的特异性反应产生荧光信号的变化，并且利用GNP与pNO520之间的MEF效应大大增强荧光信号，同时利用Cy5荧光基团作为内参以比率荧光的方式检测NO。由于靶向肽的存在，该方法可以特异性靶向线粒体检测并成像NO，同时具有高灵敏、高特异性、测定准确等优点。

主权项：1.一种基于金属荧光增强效应检测线粒体内一氧化氮的比率荧光方法，其特征在于，包括以下步骤：1将金纳米颗粒与ssDNA通过金硫键连接，形成GNP-ssDNA；2将步骤1所得GNP-ssDNA与修饰有荧光基团的cDNA碱基互补配对，形成GNP-dsDNA；3通过点击化学反应将步骤2所得GNP-dsDNA与响应探针pNO520连接，形成GNP-pNO520；4将线粒体靶向肽修饰到步骤3所得GNP-pNO520中的GNP表面，形成生物传感器Mito-GNP-pNO520；5将所得生物传感器Mito-GNP-pNO520与细胞结合，通过对细胞内的生物传感器Mito-GNP-pNO520进行共聚焦荧光成像，检测荧光强度的变化，实现线粒体内一氧化氮的定量分析。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江南大学 一种基于金属荧光增强效应检测线粒体内一氧化氮的比率荧光方法

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