申请/专利权人：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

申请日：2023-12-05

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN117347341B

主分类号：G01N21/64

分类号：G01N21/64;G01N33/569;G01N33/543;G01N33/58;B82Y15/00;B82Y40/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2024.01.23#实质审查的生效;2024.01.05#公开

摘要：本发明涉及荧光检测技术领域，公开了荧光检测器件及制备方法、荧光检测系统和荧光检测方法，荧光检测器件包括基底层、阵列孔膜层和透镜结构层，基底层上开设有多个凹槽，阵列孔膜层上设置有多个纳米孔，纳米孔的直径小于激发光的波长，以使来自基底层一侧的激发光限于纳米孔内靠近基底层一端的底部激发区内；激发区内适于设置捕获单元以将待测荧光样品固定于激发区内；透镜结构层为设置在基底层和阵列孔膜层之间的富碳非晶硅，包括多个透镜体，透镜体设置于凹槽内且与纳米孔一一对应，适于会聚来自纳米孔内待测荧光样品发出的荧光发射光。保证成像面上并行检测通量，同时增强了荧光信号的强度，保证单分子荧光大规模并行检测的准确性。

主权项：1.一种荧光检测器件，其特征在于，包括：基底层（1），所述基底层（1）上开设有多个凹槽（11）；阵列孔膜层（2），所述阵列孔膜层（2）上设置有多个纳米孔（21），所述纳米孔（21）的直径小于激发光的波长，所述纳米孔（21）呈现为亚波长结构，以使来自所述基底层（1）一侧的激发光限于所述纳米孔（21）内靠近所述基底层（1）一端的底部激发区（211）内；所述激发区（211）内适于设置捕获单元（200），以将待测荧光样品固定于所述激发区（211）内；所述捕获单元（200）包括第一抗体蛋白（203）；所述待测荧光样品包括：外泌体单元（300）和第二抗体蛋白（400），所述外泌体单元（300）包括第一跨膜蛋白（301）和第二跨膜蛋白（302），所述第一跨膜蛋白（301）适于与所述第一抗体蛋白（203）相连接，以将所述外泌体单元（300）固定在所述激发区（211）内，所述第二抗体蛋白（400）具有荧光标记且适于与所述第二跨膜蛋白（302）相连接，以使所述第二抗体蛋白（400）固定在所述外泌体单元（300）上；透镜结构层（3），设置在所述基底层（1）和所述阵列孔膜层（2）之间，所述透镜结构层（3）为富碳非晶硅，包括多个透镜体（31），所述透镜体（31）设置于所述凹槽（11）内且与所述纳米孔（21）一一对应，所述透镜体（31）的数值孔径范围为2.3-3，所述透镜体（31）适于会聚来自所述纳米孔（21）内待测荧光样品发出的荧光发射光；所述透镜体（31）在轴线方向上的截面形状为抛物线形或抛物线形的拟合图形，在所述透镜体（31）相对远离所述基底层（1）的方向上，所述纳米孔（21）靠近所述基底层（1）的一端的中心点与抛物线形或抛物线形的拟合图形的焦点之间的距离为0.5μm；所述待测荧光样品的激发光波段范围为360nm-500nm，发射光波段范围为550nm-800nm。

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