申请/专利权人：江苏大学

申请日：2021-12-16

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN114354582B

主分类号：G01N21/76

分类号：G01N21/76;G01N27/30;G01N27/327

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2022.05.03#实质审查的生效;2022.04.15#公开

摘要：本发明属于生物传感检测技术领域，具体涉及一种双信号放大电化学发光适配体传感器的制备方法及其检测Pb2+的应用；本发明旨在结合AuNCs的聚集诱导电化学发光和共振能量转移的双信号放大策略提高传感器的灵敏度，通过适配体传感技术提高选择性，构筑一种基于AuNCsTEA体系的Pb2+适配体传感器；AuNCs的聚集诱导发光行为提供高的初始ECL信号，结合共振能量转移策略猝灭AuNCs的ECL信号，提供了高的“信号‑背景”比，从而提高了检测灵敏度，即铅离子一个数量级的变化使得ECL信号变化521a.u.；检测灵敏度高、选择性好、线性范围宽，为1.0×10‑10～1.0×10‑4molL。

主权项：1.一种双信号放大电化学发光适配体传感器用于检测Pb2+的用途，其特征在于，步骤如下：1首先将6-氮杂-2-硫代胸腺嘧啶、氢氧化钠加入纯化水A中混合均匀，得到混合液A；然后将氯金酸加入纯化水B中混合均匀，得到混合液B；将混合液A加入混合液B中得到混合溶液C，在一定温度条件下避光反应后，将得到的产物装入透析袋中进行透析，透析后的产物再经冷冻干燥处理得到粉末，即为AuNCs；2将玻碳电极依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨，打磨后依次在水、乙醇和水中超声后在室温下干燥，干燥后得到预处理的玻碳电极；3将步骤1制备得到的粉末状AuNCs溶于纯化水中，得到AuNCs溶液；然后将AuNCs溶液修饰到步骤2预处理的玻碳电极表面，并在室温下干燥，干燥后的产品标记为AuNCsGCE；4取巯基功能化的互补DNA，记为cDNA；将cDNA修饰在步骤3制备的电极AuNCsGCE表面，在一定温度下孵育，孵育后的产品标记为cDNAAuNCsGCE；5在室温条件下，取6-巯基己醇溶液修饰在步骤4制备的自组装电极cDNAAuNCsGCE表面，室温条件下孵育后得到MCHcDNAAuNCsGCE；6取Pb2+适配体，记为Apt；在一定温度下将Apt修饰在步骤5制备的电极MCHcDNAAuNCsGCE表面，通过与cDNA互补固定在传感界面，在一定温度条件下反应后的产品标记为AptMCHcDNAAuNCsGCE；7将罗丹明B溶液修饰在步骤6制备的电极AptMCHcDNAAuNCsGCE表面，并在室温下孵育一段时间，形成自组装传感器，产品标记为RhBAptMCHcDNAAuNCsGCE；8将V1体积不同浓度的Pb2+标准溶液修饰在RhBAptMCHcDNAAuNCsGCE表面，室温下孵育后用纯化水对电极进行清洗；一个浓度的Pb2+溶液对应修饰一个传感器，溶液浓度和传感器呈一一对应关系；此时制备的传感器作为工作电极，饱和AgAgCl电极为参比电极，铂丝电极为对电极，检测AuNCs的ECL信号强度，以ECL信号强度为纵坐标，Pb2+浓度的log值为横坐标，建立相应标准曲线用于实际样品中Pb2+浓度的检测；9样品Pb2+的检测：首先获取样品液，修饰V2体积的样品液于传感器表面，通过电化学发光测试得到相应的ECL信号强度；将信号强度值代入步骤1构建的标准曲线，即可获知样品中Pb2+的浓度；实现未知样品中Pb2+检测的用途。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏大学 一种双信号放大电化学发光适配体传感器的制备方法及其检测Pb²⁺的应用

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