申请/专利权人：三亚中国农业科学院国家南繁研究院;中国农业科学院棉花研究所

申请日：2023-11-16

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN117230109B

主分类号：C12N15/82

分类号：C12N15/82;C12N15/53;C12N15/62;A01H5/00;A01H6/60

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2024.01.02#实质审查的生效;2023.12.15#公开

摘要：本申请属于生物工程技术领域，具体涉及代替荧光蛋白的可视化质粒及其相关应用。本发明提供的三个质粒转化进入原生质体后表达的基因，可以代谢底物L‑DOPA，使原生质体细胞产生肉眼可见的甜菜红素或甜菜黄素。这两种色素在光学显微镜下肉眼可见，可以直观判断原生质体转化实验是否成功。本发明提供地质粒能稳定指示转化成功的细胞，且自发光强度优于红色荧光蛋白tdtomato和EGFP，能完美的代替荧光蛋白在评价原生质体转化效率中的作用。该技术的出现极大简化原生质体转化实验，摆脱荧光光源的依赖，降低原生质体转化技术的使用门槛。

主权项：1.代替荧光蛋白的可视化质粒，其特征在于，所述可视化质粒为质粒pUC-tdDODA或质粒pUC-DODA；所述质粒pUC-tdDODA中代替荧光蛋白的基因包括如SEQIDNO.1所示的tdTomato基因和如SEQIDNO.2所示的DODA基因；所述质粒pUC-DODA中代替荧光蛋白的基因包括如SEQIDNO.2所示的DODA基因；所述可视化质粒的载体骨架包括pUC系列的载体骨架；所述载体骨架上还包括启动子35S和终止子为NOS；所述质粒pUC-tdDODA中tdTomato基因和DODA基因利用如SEQIDNO.3所示的DNA连接单元连接；扩增所述tdTomato基因的引物如SEQIDNO.6和SEQIDNO.7所示；扩增附带有如上所述的DNA连接单元的DODA基因的引物如SEQIDNO.8和SEQIDNO.9所示；扩增所述DODA基因的引物如SEQIDNO.10和SEQIDNO.11所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 三亚中国农业科学院国家南繁研究院;中国农业科学院棉花研究所 代替荧光蛋白的可视化质粒及其相关应用

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