申请/专利权人：深圳华大智造科技股份有限公司

申请日：2018-12-28

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN111379031B

主分类号：C40B50/06

分类号：C40B50/06;C40B40/06;C12Q1/6869

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2022.04.29#著录事项变更;2020.07.31#实质审查的生效;2020.07.07#公开

摘要：一种核酸文库构建方法、得到的核酸文库及其用途，该方法包括：使用转座酶将核酸打断成片段，同时在打断的片段两端连接上转座子序列，转座子序列上带有生物素标记；通过链置换反应补平转座子序列与打断的片段之间的缺口，得到完整的双链核酸片段；使上一步得到的双链核酸片段环化成环状核酸片段；使用链霉素亲和性磁珠结合带有生物素标记的环状核酸片段；使用打断酶对结合在链霉素亲和性磁珠上的环状核酸片段进行打断，然后进行磁分离得到结合在链霉素亲和性磁珠上的片段。本发明针对大片段文库、满足低起始量要求，能够彻底摆脱物理打断所需的昂贵设备，其优选方案能够构建成单链环状文库，并使这种文库能用于二代测序。

主权项：1.一种核酸文库构建方法，其特征在于，所述方法包括：使用转座酶将核酸打断成片段，同时在打断的片段两端连接上转座子序列，所述转座子序列上带有生物素标记；通过链置换反应补平所述转座子序列与所述打断的片段之间的缺口，得到完整的双链核酸片段；任选地，使用与所述转座子序列的全部或部分序列互补的引物序列对所述双链核酸片段进行扩增，其中所述引物序列上带有生物素标记；在连接酶作用下，使上一步得到的双链核酸片段环化成环状核酸片段；使用链霉素亲和性磁珠结合带有所述生物素标记的环状核酸片段；使用打断酶对结合在所述链霉素亲和性磁珠上的环状核酸片段进行打断，然后进行磁分离得到结合在所述链霉素亲和性磁珠上的片段。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 深圳华大智造科技股份有限公司 核酸文库构建方法、得到的核酸文库及其用途

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