申请/专利权人：生工生物工程(上海)股份有限公司

申请日：2023-12-06

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117737211A

主分类号：C12Q1/6858

分类号：C12Q1/6858;C12Q1/6895;C12N15/11

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本发明公开了一种多重扩增方法及提高突变检测精度的方法，涉及分子检测技术领域。本发明采用合成的多重扩增引物对目的样本进行第一轮扩增反应，第一轮扩增反应中的循环数为3‑5次，然后对第一轮扩增反应的产物进行多余引物的去除；取去除多余引物后的第一轮扩增反应产物继续进行第二轮扩增反应，在第二轮扩增反应中加入index引物。本发明设置了两轮扩增反应，第一轮扩增反应设置3‑5次的极低循环数，以最大限度将第一轮扩增反应中分子标签序列被重复使用的概率降至最低。低频突变可以根据同一标签序列下的测序结果进行低频突变的检出。通过循环数的控制，可以最大限度的提高低频突变的检出率，具有适用范围广的技术优势。

主权项：1.一种提高突变检测精度的多重扩增方法，其特征在于，其包括如下步骤：采用合成的多重扩增引物对目的样本进行第一轮扩增反应，第一轮扩增反应中的循环数为3-5次，然后对第一轮扩增反应的产物进行多余引物的去除；取去除多余引物后的第一轮扩增反应产物继续进行第二轮扩增反应，在第二轮扩增反应中加入index引物；所述多重扩增引物包括多个上游多重扩增引物和多个下游多重扩增引物，每个所述上游多重扩增引物的结构如下：5’-第一测序引物-分子标签序列-特异性扩增引物；每个所述下游多重扩增引物的结构如下：5’-第二测序引物-分子标签序列-特异性扩增引物。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 生工生物工程(上海)股份有限公司 一种多重扩增方法及提高突变检测精度的方法

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