申请/专利权人：河南巨龙生物工程股份有限公司

申请日：2020-12-31

公开（公告）日：2024-04-23

公开（公告）号：CN112608959B

主分类号：C12P19/26

分类号：C12P19/26;C12N1/38;C12N1/20;C12R1/19

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.23#授权;2021.04.23#实质审查的生效;2021.04.06#公开

摘要：本发明涉及一种提高乙酰氨基葡萄糖发酵单位的方法，属于发酵工程技术领域，采用大肠杆菌发酵生产乙酰氨基葡萄糖，在发酵培养阶段，对IPTG诱导进行控制，选择在不同阶段分批次添加IPTG，同时在第二次IPTG诱导时将葡萄糖酸钙和碘化钾与IPTG一同加入，发酵周期短、产酸效率高、菌体密度高；底物转化率高；而且工艺简单，环境污染低，降低了乙酰氨基葡萄糖的生产成本，有利于工业化生产的推广和应用。

主权项：1.一种提高乙酰氨基葡萄糖发酵单位的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、大肠杆菌原始菌株经斜面活化，生化培养箱37℃培养20h，再经梯度稀释，涂布于完全培养基上，挑取单个菌落分别接种到斜面上，生化培养箱30~36℃培养12h，得到活化菌种；步骤二、种子培养：将步骤一所得活化菌种接种到装有种子培养基的种子瓶中，培养条件：温度30~36℃、摇床转速200rmp、培养时间6~8h，得种子液；步骤三、将步骤二所得种子液接种到5L的发酵瓶中，接种量：5-15%，培养条件：初始发酵温度30-36℃，空气流量5~50Lmin和搅拌速度200~800rmin使溶氧维持在10~40%，发酵pH值控制在6.0~7.2之间；当菌体OD为10~15时，添加5mL浓度为0.1molL的IPTG诱导，继续培养到菌种OD值生长到50~80时，再一次性添加5mL浓度为0.1molL的IPTG、50mL浓度为5gL的葡萄糖酸钙溶液和5mL浓度为0.5gL的碘化钾溶液，继续培养10~20h结束；步骤二所述种子培养基中所含的组分及其含量分别为：葡萄糖20~30gL，K2HPO410~20gL，MgSO4·7H2O0.5~3.0gL，KH2PO410~20gL，柠檬酸0.5~3.0gL，NH42SO45~10.0gL和微量元素5~10.0mLL；步骤三发酵培养基中所含的组分及其含量分别为：葡萄糖20~30gL，K2HPO43.0~10.0gL,MgSO4·7H2O0.5~3.0gL，柠檬酸1.0~7.0gL，NH42SO45~10.0gL和微量元素5~10.0mLL。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 河南巨龙生物工程股份有限公司 一种提高乙酰氨基葡萄糖发酵单位的方法

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