申请/专利权人：江苏三黍生物科技有限公司

申请日：2023-12-21

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117737115A

主分类号：C12N15/82

分类号：C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/38;A01H1/02;A01H1/04;A01H1/08;A01H4/00

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本发明公开了一种高效纯和基因编辑的方法。运用CRISPR‑Cas9系统高效敲除木薯目的基因，实现目的基因敲除一致，采用遗传标记法鉴别单倍体种子，利用秋水仙素和二甲基亚砜进行加倍处理，实现高效木薯单倍体育种，靶基因一致率95％以上。

主权项：1.一种高效纯和基因编辑的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1选取母本木薯为靶基因编辑株系，父本木薯为编辑单倍体诱导株系，进行愈伤组织诱导；选取母本木薯中靶基因设计sgRNA，构建基于CRISPR-Cas9载体骨架的基因编辑载体，获得靶基因载体；选取父本木薯中诱导靶基因设计sgRNA，构建基于CRISPR-Cas9载体骨架的基因编辑载体，将紫色素生成基因连入载体骨架过表达启动子后，获得父本载体；将靶基因载体和父本载体分别转化入愈伤组织诱导后的母本木薯和父本木薯，筛选阳性转化母本木薯和阳性转化父本木薯；2种植阳性转化母本木薯和阳性转化父本木薯并进行诱导杂交，收获杂交种子，筛选单倍体杂交种子。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏三黍生物科技有限公司 一种高效纯和基因编辑的方法

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