申请/专利权人：通用生物(安徽)股份有限公司

申请日：2023-11-29

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN117757843A

主分类号：C12N15/864

分类号：C12N15/864

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.12#实质审查的生效;2024.03.26#公开

摘要：本发明公开了一种提高质粒转染效率的方法，属于细胞工程技术领域，包括以下步骤：S1、得到含悬浮细胞的混悬液；S2、将含悬浮细胞的混悬液离心，去除上清液，然后加入含腺相关病毒的转染混合液，轻轻摇晃混匀，得到转染混合液；S3、将转染混合液放入CO2恒温振荡培养箱，培养1‑6h后加入体积一半的含有1‑20％牛血清的培养液进行培养，继续培养20‑28h，得到含腺相关病毒的混合液；S4、使用流式细胞仪进行细胞转染率测试，即可，本发明经过多次尝试，确定转染助剂的合理用量，最终将病毒的转染效率提升至90％以上，不仅节约了大量材料，而且制备方法简单，适用范围广，极大地节约成了成本。

主权项：1.一种提高质粒转染效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将细胞复苏至T75方瓶中，使用含有0.8-2g的三抗营养液培养三代后，收获细胞状态较好的293T悬浮细胞，分别接种入3个药瓶中进行培养至细胞培养参数为接种密度在1.0×105-30.0×105个mL，放入培养箱，培养20-28h，细胞汇合率达到80-90％，得到含悬浮细胞的混悬液；S2、将含悬浮细胞的混悬液离心，去除上清液，然后加入含腺相关病毒的转染混合液，轻轻摇晃混匀，得到转染混合液；S3、将转染混合液放入CO2恒温振荡培养箱，培养1-6h后加入体积一半的含有1-20％牛血清的培养液进行培养，继续培养20-28h，得到含腺相关病毒的混合液；S4、将含腺相关病毒的混合液离心，收集细胞，在荧光显微镜下观察，同时使用流式细胞仪进行细胞转染率测试，即可。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 通用生物(安徽)股份有限公司 一种提高质粒转染效率的方法

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