申请/专利权人：江南大学

申请日：2022-03-08

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN114480465B

主分类号：C12N15/75

分类号：C12N15/75;C12N15/61;C12N15/60;C12N15/54;C12N15/53;C12N15/56;C12N1/21;C12P19/12;C12P19/14;C12P19/24;C12R1/125

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.26#授权;2022.05.31#实质审查的生效;2022.05.13#公开

摘要：本发明提供了一种产生2’‑岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于遗传工程技术领域。本发明所述重组枯草芽孢杆菌是以枯草芽孢杆菌为出发菌株，将组成型启动子控制表达的甘露糖‑6‑磷酸异构酶基因manA、磷酸甘露糖变位酶基因manB、甘露糖‑1‑磷酸鸟苷转移酶基因manC、GDP‑甘露糖脱水酶基因gmd、GDP‑岩藻糖合酶基因wcaG和α‑1,2‑岩藻糖基转移酶基因futC整合枯草芽孢杆菌基因组上，并敲除β‑半乳糖苷酶基因yesZ和ganA得到。且提供了所述重组枯草芽孢杆菌在发酵合成2’‑岩藻糖基乳糖中的应用，在5L发酵罐发酵中2’‑岩藻糖基乳糖的产量达到70.08gL，具有较强的应用价值和工业化生产潜力。

主权项：1.一种产生2’-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述重组枯草芽孢杆菌是以枯草芽孢杆菌为出发菌株，将甘露糖-6-磷酸异构酶基因manA、磷酸甘露糖变位酶基因manB、甘露糖-1-磷酸鸟苷转移酶基因manC、GDP-甘露糖脱水酶基因gmd、GDP-岩藻糖合酶基因wcaG和α-1,2-岩藻糖基转移酶基因futC整合枯草芽孢杆菌基因组上，并敲除β-半乳糖苷酶基因yesZ和ganA得到；所述甘露糖-6-磷酸异构酶基因manA的DNA序列和氨基酸序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示；所述磷酸甘露糖变位酶基因manB的DNA序列和氨基酸序列分别如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示；所述甘露糖-1-磷酸鸟苷转移酶基因manC的DNA序列和氨基酸序列分别如SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示、所述GDP-甘露糖脱水酶基因gmd的DNA序列和氨基酸序列分别如SEQIDNO.7和SEQIDNO.8所示、所述GDP-岩藻糖合酶基因wcaG的DNA序列和氨基酸序列分别如SEQIDNO.9和SEQIDNO.10所示；所述α-1,2-岩藻糖基转移酶基因futC的DNA序列和氨基酸序列分别如SEQIDNO.11和SEQIDNO.12所示；所述β-半乳糖苷酶基因yesZ的原始DNA序列和氨基酸序列分别如SEQIDNO.13和SEQIDNO.14所示；β-半乳糖苷酶基因ganA的原始DNA序列和氨基酸序列分别如SEQIDNO.15和SEQIDNO.16所示；所述甘露糖-6-磷酸异构酶基因manA、磷酸甘露糖变位酶基因manB、甘露糖-1-磷酸鸟苷转移酶基因manC、GDP-甘露糖脱水酶基因gmd、GDP-岩藻糖合酶基因wcaG和α-1,2-岩藻糖基转移酶基因futC通过组成型启动子控制表达；所述组成型启动子选自启动子P43、P6；所述启动子P43、P6的序列分别如SEQIDNO.17、SEQIDNO.23所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江南大学 一种产生2’-岩藻糖基乳糖的枯草芽孢杆菌及其应用

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