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【发明公布】一种产神经酸的解脂耶氏酵母及其构建方法和应用_江南大学;嘉兴未来食品研究院_202311822032.5 

申请/专利权人:江南大学;嘉兴未来食品研究院

申请日:2023-12-27

公开(公告)日:2024-03-29

公开(公告)号:CN117778217A

主分类号:C12N1/19

分类号:C12N1/19;C12N15/81;C12N15/90;C12P7/6409;C12R1/645

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要:本发明公开了一种产神经酸的解脂耶氏酵母及其构建方法和应用,属于代谢工程和基因工程技术领域。本发明通过在解脂耶氏酵母中异源表达多种3‑酮酯酰‑CoA合酶KCS,多种酯化酶,并强化表达了omega‑9去饱和酶、ATP‑柠檬酸裂解酶、苹果酸脱氢酶、苹果酸酶、乙酰辅酶A羧化酶和内质网调节因子,进一步敲除过氧化物酶体生物发生因子10基因、三酰甘油脂肪酶4基因、AMP‑蛋白激酶基因和△12去饱和酶基因,从而使神经酸的产量在摇瓶条件下达到了0.22gL;经补料分批发酵后神经酸的产量可以达到8gL,神经酸的占总油脂的比例达12%。本发明提供的方法为人工高效合成神经酸奠定了基础,具有广阔的工业应用前景。

主权项:1.一种产神经酸的重组解脂耶氏酵母,其特征在于,所述重组解脂耶氏酵母以Po1f-△ku70MatA,Δku70::hisG,leu2-270,ura3-302,xpr2-322,axp1-2为出发菌株,在基因组上插入了异源3-酮酯酰-CoA合酶表达盒、酯化酶表达盒、异源omega-9去饱和酶表达盒、ATP-柠檬酸裂解酶表达盒、苹果酸脱氢酶表达盒、苹果酸酶表达盒、乙酰辅酶A羧化酶表达盒和内质网调节因子表达盒,敲除了过氧化物酶体生物发生因子10基因、三酰甘油脂肪酶4基因、AMP-蛋白激酶基因和△12去饱和酶基因;其中,异源3-酮酯酰-CoA合酶表达盒含有CgKCS编码基因和LaKCS编码基因,酯化酶表达盒含有DGAT编码基因、GPAT编码基因和LAPPT编码基因,异源omega-9去饱和酶表达盒含有△15D编码基因,ATP-柠檬酸裂解酶表达盒含有ACL编码基因,苹果酸脱氢酶表达盒含有MDH编码基因,苹果酸酶表达盒含有RTME编码基因,乙酰辅酶A羧化酶表达盒含有ACC1编码基因,内质网调节因子表达盒含有INO2编码基因。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 江南大学;嘉兴未来食品研究院 一种产神经酸的解脂耶氏酵母及其构建方法和应用

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