申请/专利权人：南京师范大学

申请日：2024-01-18

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN117844844A

主分类号：C12N15/81

分类号：C12N15/81;C12N15/31;C12N15/54;C12N15/60;C12N1/19;C12P19/44;C12R1/645

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要：本发明涉及一种提升重组解脂耶氏酵母天麻素产量的方法，属于生物技术领域。本发明挖掘解脂耶氏酵母中天麻素降解相关基因，对解脂耶氏酵母中的20种葡萄糖苷酶进行了表征，探究敲除不同的葡萄糖苷酶基因对天麻素产量的影响，发现敲除葡萄糖苷酶基因YALI0A19074g和YALI0B14289g后天麻素降解解除。本发明还构建了一株天麻素降解解除的重组解脂耶氏酵母菌株YliGT6，对解脂耶氏酵母出发菌株进行构建天麻素代谢通路，增强UDP‑葡萄糖供给等操作，最后敲除葡萄糖苷酶基因YALI0A19074g和YALI0B14289g，所得重组菌株YliGT6天麻素滴度达到6.0gL。

主权项：1.一种高产天麻素的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1、将天麻素合成通路基因UGT、CAR、Ubic和PAR表达框整合至出发菌株的YALI0E18568g位点；步骤S2、将解除反馈抑制的3-脱氧-7-磷酸庚糖酸合酶DAHP基因EcaroGS180F和ScARO4K229L表达框整合至工程菌YliGT1的YALI0D15246g位点；步骤S3、将天麻素合成通路基因UGT、CAR、Ubic和PAR表达框整合至工程菌的YALI0A16379g位点；步骤S4、将天麻素合成通路基因UGT、CAR、Ubic和PAR表达框整合至工程菌的YALI0C08701g位点；步骤S5、将UDP-葡萄糖供给相关基UGT、CAR、Ubic和PAR整合至工程菌的YALI0B10153g位点；步骤S6、敲除或沉默工程菌的葡萄糖苷酶编码基因YALI0A19074g和YALI0B14289g。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京师范大学 一种提升重组解脂耶氏酵母天麻素产量的方法

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