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【发明公布】一种利用固态孔纳米技术检测细菌的方法_河南省华之源生物技术有限公司_202311822725.4 

申请/专利权人:河南省华之源生物技术有限公司

申请日:2023-12-27

公开(公告)日:2024-04-02

公开(公告)号:CN117805373A

主分类号:G01N33/569

分类号:G01N33/569

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.19#实质审查的生效;2024.04.02#公开

摘要:本发明公开了一种利用固态孔纳米技术检测细菌的方法,涉及食品检测控制的病原体微生物的细菌类检测领域,首先通过细菌富集得到呈黑色沉淀状的细菌样本;之后进行硅烷化的氮化硅固态孔的修饰,最后进行细菌检测,即将检测缓冲液加入上述硅烷化的氮化硅固态孔中,并加入富集后的细菌样本,在+150mV电压下检测细菌过孔信号即可。本发明提出一种新型的链霉亲和素Fe3O4磁珠法富集细菌,以及利用硅烷化修饰氮化硅固态孔的方法,利用修饰的磁珠在短时间内对样本快速富集,并利用设计修饰后的固态纳米孔实现对细菌实现快检,节约检测时间,减少人工操作。

主权项:1.一种利用固态孔纳米技术检测细菌的方法,其特征在于:包括以下步骤:S1、细菌富集:首先将5~200μgmL待检测样本与磁珠混合得到悬浮液;将所述悬浮液于震荡速度为110~180rpm,温度为27~39℃的条件下进行孵育,孵育时间为1~2h;之后进行磁分离,分离时间为5~10分钟;将磁分离后的磁珠缓慢重悬在相应的缓冲液中,得到磁珠重悬液;将所述磁珠重悬液与凝胶溶液混合于离心管中,进行磁分离,分离时间为10-15分钟;分离后的黑色沉淀部分即为富集后细菌样本;S2、硅烷化的氮化硅固态孔的修饰:先用无水乙醇和异丙醇对氮化硅纳米孔清洗3~5min;再用Milli-Q水清洗3~5min;后用干燥氮气吹干;接着用H2Ar混合气清洗3~8min,得到羟基化的氮化硅纳米孔;把硅烷溶液涂在羟基化的氮化硅固态孔,氮气处理30-50min;最后再用异丙醇清洗3~5min后用氮气吹干,即可得到硅烷化的氮化硅纳米孔;S3、细菌检测:将1-3mL的检测缓冲液加入上述硅烷化的氮化硅固态孔中,并加入5~15μL的富集后的细菌样本,在+150mV电压下检测细菌过孔信号即可。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 河南省华之源生物技术有限公司 一种利用固态孔纳米技术检测细菌的方法

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