申请/专利权人：上海交通大学

申请日：2021-11-09

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN114164194B

主分类号：C12N9/22

分类号：C12N9/22;C12N15/55;C12N9/14;C12N15/63;C12N15/113

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.02#授权;2022.03.29#实质审查的生效;2022.03.11#公开

摘要：本发明涉及施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI‑RE核酸酶及其应用，属于生物技术领域。本发明以PIWI‑RE家族为对象，首次公开施氏假单胞杆菌PseudomonasstutzeriDSM4166来源的PIWI‑REPsPIWI‑RE的核酸酶催化特性和作用机制。本发明公开的蛋白、核酸、多酶体系、试剂盒和方法能够对细胞内和细胞外的遗传物质进行位点特异性修饰，为开发基于原核生物来源PIWI‑RE介导的基因编辑、修饰及分子检测技术提供了一种新工具，可应用于核酸检测、基因编辑和基因修饰等生物技术领域。该研究首次阐明PIWI‑RE蛋白工作模式，对于拓展对PIWI超家族的认识，挖掘PIWI家族的新型基因编辑酶具有重要的意义。

主权项：1.一种施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE核酸酶的应用，其特征在于，5’OH-RNA，5’P-RNA引导所述施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE核酸酶对配对ssDNA的特异性剪切，5’P-RNA的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示，5’OH-RNA的氨基酸序列如SEQIDNO.6所示；或，5’OH-DNA，5’P-DNA引导所述施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE核酸酶对配对ssRNA的特异性剪切，5’P-DNA的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示，5’OH-DNA的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示；施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE核酸酶氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；所述施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE核酸酶作为基因编辑或基因修饰工具的应用条件为20-65℃；所述施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE核酸酶作为基因编辑或基因修饰工具的应用条件为：在含有Mg2+和Mn2+的条件下使用。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海交通大学 施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE核酸酶及其应用

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