申请/专利权人：云南省烟草农业科学研究院

申请日：2021-11-09

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN114019057B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/72

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.02#授权;2022.02.25#实质审查的生效;2022.02.08#公开

摘要：本发明公开了一种烟叶中原花青素含量的检测方法，该检测方法为可同时检测烟叶原花青素中的儿茶素、表儿茶素、原花青素B1和原花青素B2，具体包括以下步骤：样品预处理，提取，净化和原花青素的检测。本发明通过快速、简单、可靠的提取方法对烟草样品中原花青素进行提取，通过加入Carbon分散吸附剂去除基质效应，采用高选择性、高灵敏度的超高效液相色谱法测定烟叶中原花青素的残留量；相比现有技术，本发明的检测方法具有样品处理简便、检测灵敏度和准确性更高的特点，能完全满足原花青素检测要求。

主权项：1.一种烟叶中原花青素含量的检测方法，其特征在于，所述检测方法为可同时检测烟叶原花青素中的儿茶素、表儿茶素、原花青素B1和原花青素B2，具体包括以下步骤：S1、样品预处理：将新鲜的烟叶样品放入研钵，加液氮研磨粉碎，将研磨好的样品转入冻干机进行冷冻干燥，得到待测样品，将待测样品置于冰箱保存待用；S2、提取：称取步骤S1中的待测样品0.05g至离心管中，加入乙腈水溶液，超声提取20～30min后离心分离，得上清液；S3、净化：移取步骤S2中的上清液至离心管中，加入分散吸附剂旋涡振荡2～5min，二次离心分离，得净化后的上清液；吸取净化后的上清液过0.22μm有机相滤膜后放入装有内插管的进样瓶中待检；S4、原花青素的检测：利用超高效液相色谱-串联质谱法检测步骤S3中的待检样品；所述步骤S4中利用超高效液相色谱-串联质谱检测时，所述超高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱：ACQUITYUPLCBEHC18：10mm×2.1mm，1.7μm；柱温：25℃；进样量：2μL；流速：0.35mLmin，流动相A：0.2％乙酸甲醇，流动相B：0.2％乙酸水，梯度洗脱：0～1min，5％A；1～3min，5％～25％A；3～5min：25％A；5～9min:25％～80％A；9～11min：80％A；11～11.1min:5％A；11.1～13min：5％A；所述质谱检测的检测条件为：离子源：ESI；扫描方式：负离子模式；气帘气压力：40psi；雾化气压力：60psi；辅助气压力：50psi；离子源温度：600℃；喷雾电压：-4000V，采用多反应监测MRM模式；所述质谱检测的参数为： 所述步骤S2中的乙腈为80％的乙腈，加入量为1mL；所述分散吸附剂为Carbon分散吸附剂，加入量为25～100mg。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 云南省烟草农业科学研究院 一种烟叶中原花青素含量的检测方法

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