申请/专利权人：山东瑞安泰医疗技术有限公司

申请日：2023-07-18

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN117844731A

主分类号：C12N5/00

分类号：C12N5/00;C12N5/077

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要：本发明公开了一种骨髓液的提取方法，属于细胞培养基技术领域。该提取方法包括以下五个步骤，分别为破骨取髓、低温分离、辐照灭菌、微孔过滤和抽检包装。具体步骤为将新鲜的骨头样品进行软化消毒，刮取的新鲜骨髓经过粗滤离心、辐照灭菌、多次微孔滤膜过滤，直接分装并迅速冷冻保存，将分装的骨髓液进行抽样检测，最后对合格产品进行包装。本发明在万级洁净车间提取骨髓液较传统血清不仅含有更丰富的生长因子，而且对细胞培养有害的病毒、细菌内毒素、补体、抗体等成分含量较少，可为体外各类细胞的生长繁殖提供一种天然培养基，具有良好的应用前景。

主权项：1.一种骨髓液的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括以下五个步骤，分别为破骨取髓，低温分离，辐照灭菌，微孔过滤，抽检包装；所述的破骨取髓，将新鲜的骨头样品先用去离子水冲洗去除血水，然后浸泡在弱酸溶液中，再用0.9%NaCl冲洗直接转移至超净台中，用电锯将骨头样品从中一分为二，用不锈钢药匙刮取骨髓，置于离心管中，并加入缓冲液，立即放置在摇床振荡混匀，重复三次；所述的低温分离，离心机温度参数设置为0~4℃，低速离心后由上向下分为脂肪层、骨髓液和沉淀，剥开脂肪层让骨髓液经细胞滤网过滤至新的离心管中，再高速离心，重复两次；所述的辐照灭菌，在超净台内，将高速离心后的骨髓液转移至PETG瓶，然后进行γ射线照射；所述的微孔过滤，辐照灭菌后的骨髓液在超净台里按孔径由大到小进行微孔滤膜过滤，其中最小孔径的滤膜至少重复两次，分装到PETG瓶，迅速保存于-20℃以下；所述的抽检包装，将分装的骨髓液进行抽样检查，检查的项目包括化学分析、微生物检测、病毒检测和生长因子检测，对检测合格的样品进行包装。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山东瑞安泰医疗技术有限公司 一种骨髓液的提取方法

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