申请/专利权人：北京青莲百奥生物科技有限公司

申请日：2024-01-22

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN117599763B

主分类号：B01J20/26

分类号：B01J20/26;G01N30/08;G01N30/88;B01J20/28;B01J20/30;C12N5/078

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.09#授权;2024.03.15#实质审查的生效;2024.02.27#公开

摘要：本发明公开了一种双富集基团富集磁珠的制作方法及应用，本发明制备的双富集基团富集磁珠兼具有阳离子季铵盐与金属离子基团，通过利用外泌体膜磷脂双分子层中磷酸基团与金属钛离子的配位螯合作用，同时带有正电的季铵盐与带有负电磷酸的静电吸附的作用，实现对血液外泌体的高特异性提取，提取速度快，回收率高。

主权项：1.一种双富集基团富集磁珠的制作方法，其特征在于，所述方法包括步骤：1）GO-Fe3O4、乙醇和水混合，搅拌，加入MPS、氨水、TEOS，孵育，孵育后加热至70℃，反应得到第一产物；2）第一产物加入到含有乙腈、甲基丙烯酸、N,N'-亚甲基丙烯酰胺、AIBN、N-乙烯基甲酰胺的混合物中，加热到110℃，回流冷凝，机械搅拌反应，60℃下烘干得到第二产物；3）将水加热到100℃，调整水的pH9，将第二产物加入100℃水中，回流冷凝，搅拌反应，反应结束后冷却至室温，调节pH到9-10，加入二氧六环，加入碳酸酐二叔丁酯，室温搅拌反应，60℃下烘干得到第三产物，全部第三产物加入去离子水，调节pH为10，逐滴加入缩水甘油基三甲基氯化铵，反应，室温下搅拌过夜，干燥得第四产物，所有第四产物溶于DCM与TFA混合溶液中，室温反应，干燥得第五产物，所有第五产物分散于DMSO中，依次加入EDC、NHS、三乙胺、3-膦酰基丙酸、室温反应，得到第六产物，将所有第六产物分散于硫酸钛水溶液中，室温搅拌反应，干燥得最终产物；所述步骤1）中GO-Fe3O4、乙醇、水、MPS、氨水、TEOS的比例为30mg：40mL：10mL：1mL：4mL：240μL；所述步骤2）中第一产物、乙腈、甲基丙烯酸、N,N'-亚甲基丙烯酰胺、AIBN、N-乙烯基甲酰胺的比例为30mg：40mL：100μL：60mg：10mg：60mg；所述步骤3）水、第二产物、碳酸酐二叔丁酯、缩水甘油基三甲基氯化铵、去离子水、DMSO、EDC、NHS、三乙胺、3-膦酰基丙酸、硫酸钛水溶液的比例为15mL：30mg：240mg：1mL：30mL：5mL：382mg：230mg：250μL：30mg：50mL。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京青莲百奥生物科技有限公司 一种双富集基团富集磁珠的制作方法及应用

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