申请/专利权人：苏州大学

申请日：2024-01-12

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117871865A

主分类号：G01N33/68

分类号：G01N33/68;G01N1/40;G01N1/28;G01N27/62

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明公开了一种基于固相氨基苯并硼酸衍生物在全方位N‑和O‑连接糖基化位点特异性中的分析方法。该技术通过胰蛋白酶和C18对蛋白样本进行处理，得到不含杂质的多肽和糖肽样本后，通过PNGaseF，首先分析样本中的N‑糖基化位点，并对N‑糖蛋白进行定量分析，再使用GalNAcEXO，将GalNAcTn抗原糖肽酶切分析，得到样本中所含有的Tn抗原O‑糖肽；接着，用O‑Glycosidase可将样本中的二糖结构Gal‑GalNAc单独分离进行质谱分析，得到同一样本中的T抗原O‑糖肽；最后，可用不同的O‑糖蛋白酶，将复杂O‑糖基化多肽水解。本技术可全面分析N‑糖基化和不同类别的O‑糖基化，为寻找疾病特异性糖基化提供了技术支撑。

主权项：1.一种基于固相氨基苯并硼酸衍生物在全方位N-和O-连接糖基化位点特异性中的分析方法，其特征在于，包括步骤：1通过胰蛋白酶酶解糖蛋白形成糖肽和多肽；2利用固相氨基苯并硼酸衍生物介质特异性富集样本中的糖肽，得到已连接上糖肽的固相介质；3利用N-糖苷酶对所述已连接上糖肽的固相介质进行N-糖基化分析，并定量检测N-糖蛋白；4使用GalNAcEXO酶来切割所述已连接上糖肽的固相介质中带有GalNAc的O-糖基化位点，获得Tn抗原O-糖肽；5利用O-Glycosidase酶对所述已连接上糖肽的固相介质进行切割分析，从而得到T抗原O-糖肽；6使用OpeRATOR富集具有无唾液酸修饰的复杂O-聚糖糖肽；7使用IMPa富集唾液酸化复杂O-糖肽。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 苏州大学 基于固相氨基苯并硼酸衍生物在全方位N-和O-连接糖基化位点特异性中的分析方法

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