申请/专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所

申请日：2023-12-13

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117867171A

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明公开了一种小反刍兽疫病毒的可视化RT‑LAMP检测方法，基于PPRVM基因建立了一种可视化环介导等温扩增检测方法。通过NCBI数据库选取和比对PPRVN和M基因序列，设计并筛选特异性引物，经温度、镁离子、dNTP、引物浓度等试验条件优化，建立了以中性红染料为显示剂、以病毒M基因为检测对象的PPRV可视化RT‑LAMP检测方法。可视化RT‑LAMP的检测最低限度为1.5×102copies，其灵敏度比RT‑PCR高1000倍，特异性与RT‑qPCR相当；临床样品检测表明，建立的可视化RT‑LAMP方法可在45min内完成检测，与商品化直接RT‑qPCR试剂盒检测结果一致，但较RT‑PCR和RT‑qPCR用时短且操作简单；本检测方法较RT‑PCR、ELISA等方法更为便携和快速，可解决技术与设备匮乏地区及现场快速的检测难题。

主权项：1.小反刍兽疫病毒的可视化RT-LAMP检测引物组，其特征是：包括如下三个引物对：外引物：PPRV-F3：5’-ACCGAGATCTACGACTTCGA-3’；PPRV-B3:5’-AGAGCCAAAGGTTCTTCCG-3’；内引物：PPRV-FIP：5’-TCAGTCGGCCGTCGTGGTAG-GCATGGGATGTCAAAGGGT-3’；PPRV-BIP：5’-CGATCCTGGTCTGGGAGACAGA-AGGGGGTCGTTATCCTCAA-3’；环引物：PPRV-LF：5’-TGGGTTCTATGCGGGCAATT-3’；PPRV-LB：5’-GAGTGCTTTATGTACCTGTTTCTCC-3’。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种小反刍兽疫病毒的可视化RT-LAMP检测方法

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