申请/专利权人:中国医学科学院北京协和医院
申请日:2024-01-10
公开(公告)日:2024-04-12
公开(公告)号:CN117859703A
主分类号:A01K67/0278
分类号:A01K67/0278;C12N15/12;C12N15/85;C12N15/113;C12N15/55
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开
摘要:本发明提供了一种Anxa11基因的新突变致病位点C104G的敲入小鼠模型及其构建方法,所述方法包括:获得活性的sgRNA,所述sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;获得有活性的Cas9mRNA,所述Cas9核苷酸序列如SEQIDNO.3所示;将所述有活性的sgRNA、Cas9mRNA和核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的打靶供体混合后显微注射到小鼠受精卵中,获得F0代小鼠;选择F0代阳性小鼠与野生型小鼠进行交配,从而获得具有稳定基因型的F1代小鼠;后筛选获得Anxa11基因突变敲入模式小鼠。该方法基因编辑效率高。
主权项:1.一种Anxa11基因的新突变致病位点C104G的敲入小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述方法包括:将核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的sgRNA体外转录成mRNA,获得活性的sgRNA;获得有活性的Cas9mRNA;将所述有活性的sgRNA、Cas9mRNA和核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的打靶供体混合后显微注射到小鼠受精卵中,获得F0代小鼠;选择F0代小鼠基因型鉴定结果中的F0代阳性小鼠,使其与野生型小鼠进行交配,从而获得具有稳定基因型的F1代小鼠;后筛选出发生正确重组的基因打靶小鼠,即获得Anxa11基因敲入模式小鼠。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国医学科学院北京协和医院 Anxa11基因的新突变致病位点C104G的敲入小鼠模型及其构建方法与应用
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