申请/专利权人：中国医学科学院北京协和医院;中国医学科学院医学实验动物研究所

申请日：2024-01-22

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN117887760A

主分类号：C12N15/85

分类号：C12N15/85;C12N15/89;A01K67/0278;C12N15/113;C12N15/55

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.16#公开

摘要：本发明提供了一种SQSTM1p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型及其构建方法，所述方法包括：获得核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的gRNA1和核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的gRNA2；获得有活性的Cas9mRNA；将所述gRNA、Cas9mRNA和核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的打靶供体doner混合后显微注射到小鼠受精卵中，获得F0代小鼠；选择F0代阳性小鼠与野生型小鼠进行交配，获得具有稳定基因型的F1代小鼠；后筛选获得SQSTM1p62基因突变敲入模式小鼠。该方法基因编辑效率高，可表达人SQSTM1p62突变蛋白。

主权项：1.一种SQSTM1p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述方法包括：将核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的gRNA1和核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的gRNA2分别体外转录成mRNA，获得活性的gRNA1和gRNA2；获得有活性的Cas9mRNA；获得核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的打靶供体；将所述gRNA1、gRNA2、Cas9mRNA和打靶供体混合后显微注射到小鼠受精卵中，获得F0代小鼠；选择F0代小鼠基因型鉴定结果中的F0代阳性小鼠，使其与野生型小鼠进行交配，从而获得具有稳定基因型的F1代小鼠；后筛选出发生正确重组的基因打靶小鼠，即获得SQSTM1p62基因敲入模式小鼠。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国医学科学院北京协和医院;中国医学科学院医学实验动物研究所 SQSTM1/p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型及其构建方法

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