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【发明公布】一种基于RPA-CRISPR-Cas12a检测布鲁氏菌的系统及其应用_东沃同泰(凤城)生物工程有限公司_202310752976.3 

申请/专利权人:东沃同泰(凤城)生物工程有限公司

申请日:2023-06-25

公开(公告)日:2024-04-12

公开(公告)号:CN117867140A

主分类号:C12Q1/689

分类号:C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/113;C12N15/11;C12R1/01

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要:本发明涉及基因检测技术领域,特别是涉及一种基于RPA‑CRISPR‑Cas12a检测布鲁氏菌的系统及其应用。本发明设计的RPA引物以布鲁氏菌的RNA为模板进行特异性扩增,得到的扩增产物含有可被CrRNA识别的靶标序列,CrRNA识别靶标序列后切割靶标序列,并具有对非特异性单链报告分子的切割活性,单链报告分子的5’端的T碱基上连接荧光标记肽,利用LF试纸条检测单链报告分子是否被切割,从而实现布鲁氏菌的可视化检测。本发明提供的系统可以在无需大型仪器的恒温条件37℃下进行实地检测,具有特异性好、灵敏性高、操作简单、要求较低和耗时短的特点。

主权项:1.一种基于RPA-CRISPR-Cas12a检测布鲁氏菌的系统,其特征在于,包括:RPA引物、CrRNA、单链报告分子和LF试纸条;所述RPA引物包括F和R;所述F的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示;所述R的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;所述CrRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示;所述单链报告分子的核苷酸序列为5’-TTATTATT-3’;所述单链报告分子的5’端连接荧光标记肽,所述单链报告分子的3’端连接生物素。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 东沃同泰(凤城)生物工程有限公司 一种基于RPA-CRISPR-Cas12a检测布鲁氏菌的系统及其应用

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