申请/专利权人:楷拓生物科技(苏州)有限公司;武汉楷拓生物科技有限公司;上海楷拓生物科技有限公司
申请日:2023-12-28
公开(公告)日:2024-04-30
公开(公告)号:CN117947017A
主分类号:C12N15/10
分类号:C12N15/10
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开
摘要:本发明涉及一种质粒DNA的分离纯化方法。该分离纯化方法包括以下步骤:1含目的质粒的菌体裂解液经过滤得到含目的质粒的菌体裂解上清液;2将含目的质粒的菌体裂解上清液经膜浓缩后换液得到粗提溶液;3将粗提溶液依次通过第一层析柱和第二层析柱进行层析分离,得到纯化后的质粒溶液,其中,第一层析柱所采用的填料为具有分子筛功能、离子交换功能和疏水功能的多功能填料,第二层析柱所采用的填料为亲和填料。本发明方法通过工艺整体设计,特别是采用特定的两步层析相结合,实现了高纯高品质质粒DNA的高效生产,成本更低更适用于工业化水平质粒分离纯化。本发明工艺适用于不同大小及类型的目的质粒DNA分离纯化,适用性广。
主权项:1.一种质粒DNA的分离纯化方法,其特征在于:所述的分离纯化方法包括以下步骤:1含目的质粒的菌体裂解液经过滤得到含目的质粒的菌体裂解上清液;2将所述含目的质粒的菌体裂解上清液经膜浓缩后换液得到粗提溶液;3将所述粗提溶液依次通过第一层析柱和第二层析柱进行层析分离,得到纯化后的质粒溶液,其中,第一层析柱所采用的填料为具有分子筛功能、离子交换功能和疏水功能的多功能填料,所述第二层析柱所采用的填料为亲和填料。
全文数据:
权利要求:
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