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申请/专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院
申请日：2024-02-02
公开（公告）日：2024-04-30
公开（公告）号：CN117947074A
主分类号：C12N15/70
分类号：C12N15/70;C12N15/65;G01N33/68;C12R1/19
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开
摘要：本发明提出一种构建基于APEX2标记的应用于不同细胞体系上的膜蛋白反式互作的邻近标记复合物的方法，其包括：第一步，构建重组基因；第二步，诱导蛋白表达、纯化、酶切，生成作为诱饵蛋白的融合表达的细胞质外膜蛋白。该方法通过对目的蛋白膜蛋白与APEX2进行融合表达后纯化，与细胞进行共孵育，再加入反应底物进行标记后，就能对目的蛋白在细胞膜上的互作蛋白组进行生物素化标记，再通过质谱技术，就能鉴定出目的蛋白在细胞膜上的互作蛋白，这一创新允许在不同的细胞体系中研究膜蛋白的互作蛋白组，弥补了现有技术在处理跨细胞体系互作的局限性。
主权项：1.一种构建基于APEX2标记的用于膜蛋白反式互作的邻近标记复合物的方法，其特征在于，包括：第一步，构建重组基因；第二步，诱导蛋白表达、纯化、酶切，生成作为诱饵蛋白的融合表达的细胞质外膜蛋白。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院深圳先进技术研究院 用于膜蛋白反式互作的邻近标记复合物、标记方法及分析方法
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