申请/专利权人：生物岛实验室;中国科学院广州生物医药与健康研究院

申请日：2021-07-30

公开（公告）日：2023-01-24

公开（公告）号：CN113801915B

主分类号：C12Q1/6804

分类号：C12Q1/6804;C12Q1/6806;C40B50/06

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.01.24#授权;2022.01.04#实质审查的生效;2021.12.17#公开

摘要：本发明涉及一种获取目标RNA结合蛋白靶RNA的方法。所述方法包括a将透化细胞与特异性识别所述目标RNA结合蛋白RBP的抗体以及融合蛋白接触，以在所述透化细胞内形成融合蛋白‑抗体‑RBP‑RNA复合物；所述融合蛋白具有proteinA和或proteinG结构域、微球菌核酸酶结构域以及配偶体结构域；b激活所述微球菌核酸酶结构域进行酶切；c将酶切产物与固相载体共孵育，所述固相载体能够特异性结合所述配偶体结构域以捕获所述复合物；d洗去未结合的杂质，提取所述复合物中的RNA。

主权项：1.一种获取目标RNA结合蛋白靶RNA的方法，其特征在于，包括：a将透化细胞与特异性识别所述目标RNA结合蛋白RBP的抗体以及融合蛋白接触，以在所述透化细胞内形成融合蛋白-抗体-RBP-RNA复合物；所述融合蛋白具有proteinA和或proteinG结构域、微球菌核酸酶结构域以及配偶体结构域，所述配偶体选自标签蛋白、受体、抗体、抗原、互补序列中的一条、适配体和凝集素中的至少一种；b激活所述微球菌核酸酶结构域进行酶切，除去酶切产物中的DNA片段，其中，所采用的激活剂为3mM～7mMCa2+；c将酶切产物与固相载体共孵育，所述固相载体能够特异性结合所述配偶体结构域以捕获所述复合物；d洗去未结合的杂质，提取所述复合物中的RNA。

全文数据：

权利要求：

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