申请/专利权人:宁波甲贝医药科技有限公司
申请日:2023-04-27
公开(公告)日:2023-10-24
公开(公告)号:CN116926163A
主分类号:C12Q1/6806
分类号:C12Q1/6806
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2023.11.10#实质审查的生效;2023.10.24#公开
摘要:本发明提供了一种基于脱氧核酶的完整测定mRNAPolyA尾的方法,该方法包括:步骤S1,根据底物mRNA的序列特征,选择脱氧核酶的结构;步骤S2,根据碱基互补配对原则,设计所选结构的脱氧核酶的双臂,得到完整的脱氧核酶;步骤S3,将完整的脱氧核酶与底物mRNA退火,对底物mRNA的特定位点进行特异性酶切,产生具有完整长度的PolyA片段;步骤S4,用OligodT磁珠富集纯化具有完整长度的PolyA片段,利用LC‑MS对富集纯化所得的具有完整长度的PolyA片段进行检测。该方法既可以用于分段式mRNAPolyA尾的完整测定,也可以用于连续式mRNAPolyA尾的完整测定。与现有技术相比,该方法实现了对分段式mRNAPolyA尾的完整测定。
主权项:1.一种基于脱氧核酶的完整测定mRNAPolyA尾的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤S1,根据底物mRNA的序列特征,选择脱氧核酶的结构;步骤S2,根据碱基互补配对原则,设计所选结构的脱氧核酶的双臂,得到完整的脱氧核酶;步骤S3,将所述完整的脱氧核酶与所述底物mRNA退火,对所述底物mRNA的特定位点进行特异性酶切,产生具有完整长度的PolyA片段;步骤S4,用OligodT磁珠富集纯化所述具有完整长度的PolyA片段,利用LC-MS对富集纯化所得的具有完整长度的PolyA片段进行检测。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 宁波甲贝医药科技有限公司 一种基于脱氧核酶的完整测定mRNA PolyA尾的方法
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