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【发明公布】一种基于DC Line诱导的CTL细胞及其制备方法_北京惠大生物科技有限公司_202311220492.0 

申请/专利权人:北京惠大生物科技有限公司

申请日:2023-09-20

公开(公告)日:2023-12-15

公开(公告)号:CN117230007A

主分类号:C12N5/0783

分类号:C12N5/0783;C12N5/0784;C12N5/078;C12N5/10;C12N15/867;A61K35/17;A61P35/00;A61P31/16

优先权:["20230118 CN 2023100791810"]

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.01.02#实质审查的生效;2023.12.15#公开

摘要:本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种基于DCLine诱导的CTL细胞及其制备方法。本发明提供了一个新的技术方向,采用DC细胞株负载黑色素瘤分化抗原MART‑1或甲型流感病毒M1蛋白的限制性表位多肽与T细胞共孵育,诱导其活化、扩增,可获得特异性肿瘤或病毒杀伤细胞CTL,成本低,细胞数量充足,培养成功率高,制得的CTL细胞可应用于预防和或治疗黑色素瘤或流感病毒感染。

主权项:1.采用DC细胞株负载抗原活化、扩增T细胞,获得特异性杀伤细胞CTL的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1抽取受试者外周血,采用淋巴细胞分离液分离获得外周血单个核细胞PBMC;2复苏DC细胞株,培养至对数生长期,调整细胞密度为1~2×106cellsmL,加入抗原限制性表位多肽,终浓度为2~10μgmL,37℃负载3~6h;3将负载抗原肽的DC细胞与患者PBMC混合培养,DC细胞与PBMC的数量比为1:10~1:100,并向培养体系中加入IL-2,终浓度为200~1000IUmL;4培养过程中,每隔2~3天取样计数,用完全培养基补液或传代,维持细胞浓度为0.5~2×106cellsmL;5在第7天和第14天,重复步骤2、3取DC细胞负载抗原多肽,向培养体系中补加负载抗原肽的DC细胞,负载抗原肽的DC细胞与培养体系中细胞的数量比为1:10~1:100,于第20~21天收集细胞,获得特异性杀伤细胞CTL;所述步骤1和步骤2不区分先后顺序。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 北京惠大生物科技有限公司 一种基于DC Line诱导的CTL细胞及其制备方法

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