申请/专利权人：香港科技大学深圳研究院;香港科技大学

申请日：2020-08-27

公开（公告）日：2024-01-12

公开（公告）号：CN114113350B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/72

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.12#授权;2022.03.18#实质审查的生效;2022.03.01#公开

摘要：本发明提出了一种老香黄年份的判别方法，包括以下步骤：步骤S1、选取化学标志物；取不同年份的多种老香黄，分别采用相同的湿法破碎过滤方案处理所述多种老香黄，得到所述多种老香黄的供试品溶液；再分别检测分析所述多种老香黄的供试品溶液中化学标志物的含量；步骤S2、取待测试老香黄，采用所述湿法破碎过滤方案处理该待测试老香黄，得到待测试老香黄的供试品溶液；再检测分析待测试老香黄的供试品溶液中化学标志物的含量；步骤S3、根据老香黄的供试品溶液中化学标志物的含量与老香黄的年份的相关性，确定待测试老香黄的年份。本发明的老香黄年份的判别方法设计巧妙，实用性强。

主权项：1.一种老香黄年份的判别方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1、选取化学标志物为5,7-二甲氧基香豆素、香叶木苷、山柰酚、黄柏酮、金圣草素、柠檬苦素中的一种或多种；取不同年份的老香黄，分别采用相同的湿法破碎过滤方案处理，得到所述老香黄的供试品溶液；再分别检测分析所述老香黄的供试品溶液中化学标志物的含量；步骤S2、取待测试老香黄，采用所述湿法破碎过滤方案处理该待测试老香黄，得到待测试老香黄的供试品溶液；再检测分析待测试老香黄的供试品溶液中化学标志物的含量；将内标物添加到待测试老香黄的供试品溶液中；采用UPLC-MSMS检测待测试老香黄的供试品溶液，从而获得待测试老香黄的供试品溶液的MRM叠加色谱图；根据待测试老香黄的供试品溶液的MRM叠加色谱图通过定量分析得到待测试老香黄的供试品溶液中化学标志物的含量；所述定量分析是基于化学标志物对应的特征峰面积与内标物对应的特征峰面积的比值进行；步骤S3、将待测试老香黄的供试品溶液中化学标志物的含量分别与所述不同年份老香黄的供试品溶液中化学标志物的含量进行对比,根据老香黄的供试品溶液中化学标志物的含量与老香黄的年份的相关性，确定待测试老香黄的年份；其中，步骤S1还包括：步骤S1.1、将内标物添加到老香黄的供试品溶液中；采用UPLC-MSMS检测所述多种老香黄的供试品溶液，从而获得所述多种老香黄的供试品溶液的MRM叠加色谱图；选择并根据其中一种老香黄的供试品溶液的MRM叠加色谱图通过定性分析确定所选择的老香黄的供试品溶液中的化学成分，并根据特征峰的显著性选择所分析确定的化学成分中的部分或全部作为候选标志物；根据所述多种老香黄的供试品溶液的MRM叠加色谱图通过定量分析得到所述多种老香黄的供试品溶液中候选标志物的含量；所述定量分析是基于候选标志物对应的特征峰面积与内标物对应的特征峰面积的比值进行；步骤S1.2、基于所述多种老香黄的供试品溶液中候选标志物的含量采用主成分分析和或聚类分析和或正交偏最小二乘法-判别分析从候选标志物中筛选确定能够区分不同年份老香黄的物质,并以此作为化学标志物；检测待测试老香黄的供试品溶液的色谱质谱条件为：色谱条件：色谱柱：WatersACQUITYUPLCBEHC18，2.1mm×50mm,1.7μm；柱温：30℃；流动相：0.1％甲酸水溶液A-乙腈溶液B；梯度洗脱程序：0-2min，95％-85％A；2-6min，85％-85％A；6-10min，85％-47％A；10-12min，47％-5％A；12-14min，5％-95％A；14-17min，95％-95％A；流速：0.3mL·min-1；进样量：1μL；质谱条件：离子源检测模式：ESI+-多反应监测模式MRM；毛细管电压：5500V；干燥气流速：100Lpm：质谱接口温度：280℃；雾化气流速：120Lpm；离子源温度：450℃；待测成分MRM质谱分析参数见下表：

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