申请/专利权人：南昌大学第一附属医院

申请日：2023-12-21

公开（公告）日：2024-03-05

公开（公告）号：CN117646079A

主分类号：C12Q1/689

分类号：C12Q1/689;C12Q1/6844;G01N33/569;G01N33/543;G01N33/532;C12N15/11;C12R1/22

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.22#实质审查的生效;2024.03.05#公开

摘要：本发明公开了一种检测高毒力耐药肺炎克雷伯菌的方法，具体包括目标菌的富集、核酸提取、环介导等温扩增和数据分析步骤，属于生物检测技术领域。本发明针对高毒力耐药肺炎克雷伯菌的毒力基因peg‑344和耐药基因kpc‑2设计了特异性引物，构建的多重LAMP反应体系特异性强、灵敏度高、结果判定简单，可在63℃45min内出结果。另一方面，本发明制备了链霉亲和素包被的磁性纳米粒子复合物通过其与生物素化抗体结合进行目的菌的捕获，分离效率更高，不仅消除了检测基质的影响还缩短了富集时间，使整体检测时间缩短至2h以内。本发明的方法可对高毒力耐药肺炎克雷伯菌进行快速检测，在流行病学上有重要意义，可在基层医疗单位、基层防疫部门进一步推广。

主权项：1.用于检测高毒力耐药肺炎克雷伯菌的多重LAMP引物组，由毒力peg-344基因引物组和耐药kpc-2基因引物组构成，其特征在于，所述基因引物组均包括：外引物F3B3、内引物BIPFIP以及环引物LFLB；其中，单增peg-344基因引物组的序列如SEQIDNo.1～SEQIDNo.6所示：SEQIDNo.1F3：TGGGGTTATTCTTTCGCTSEQIDNo.2B3：TTTCCAAGCTTACTGCAATTSEQIDNo.3FIP：CCAGCAAAACAGCCTAAATACATTG-TGGGGAGTATCTTTGAGAGGSEQIDNo.4BIP：TTGGGATACTGTGCTATTTTTCTCT-GGGAAGATGAGAAATACGAGCSEQIDNo.5LF：GCAGAAAAGGGCTAGCGCSEQIDNo.6LB：CGCCTCCGTGATGAGGATG单增kpc-2基因引物组的序列如SEQIDNo.7～SEQIDNo.11所示：SEQIDNo.7F3：TGGCTTTTCTGCCACCGSEQIDNo.8B3：TGCGAGCCAGCACAGCSEQIDNo.9FIP：TACACACCGATGGAGCCGCC-CCTCGTCGCGGAACCATSEQIDNo.10BIP：GGCTCAGGCGCAACTGTAAGT-GCAGCAAGAAAGCCCTTGAASEQIDNo.11LB：AAGTCCTGTTCGAGTTTAGCGA。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南昌大学第一附属医院 一种检测高毒力耐药肺炎克雷伯菌的方法

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