申请/专利权人：鹍远基因公司

申请日：2018-04-18

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN110770354B

主分类号：C12Q1/6806

分类号：C12Q1/6806;C12Q1/6844;C12Q1/6853;C12Q1/6855;C40B50/14;C12N15/10

优先权：["20170419 US 62/487,423","20180413 US 62/657,544"]

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2020.05.08#实质审查的生效;2020.02.07#公开

摘要：本公开内容涉及用于构建多核苷酸文库和或多核苷酸测序的方法。还公开了相关的试剂盒和装置。本公开内容还涉及用于通过例如多核苷酸测序进行基因和基因组分析的组合物、试剂盒、装置和方法。在特定方面，本文中提供了用于在测序期间以提高的连接效率和转化率构建文库的组合物、试剂盒和方法。在特定实施方案中，本文中的组合物、试剂盒和方法用于分析受试者体内的多核苷酸片段，例如循环多核苷酸片段，包括循环肿瘤DNA。

主权项：1.一种方法，所述方法包括将一组接头连接至单链多核苷酸的文库，其中：所述连接是由单链DNAssDNA连接酶催化的，各单链多核苷酸在5'端被封闭以防止在5'端连接，各接头包含对所述接头所连接的单链多核苷酸进行标记的独特分子标识符UMI序列，并且在3'端被封闭以防止在3'端连接；并且所述接头的5'端与所述单链多核苷酸的3'端通过ssDNA连接酶连接以形成线性连接产物，由此得到线性单链连接产物的文库，所述方法进一步包括将所述线性单链连接产物的文库转化为线性双链连接产物的文库；所述方法进一步包括扩增所述线性双链连接产物的文库，所述扩增通过使用下列成分的聚合酶链反应PCR：一组引物，每个引物均包含与所述接头反向互补和或与所述接头可杂交的序列；和可与靶序列杂交的引物，由此获得包含靶序列的序列信息的线性双链连接产物的扩增文库；并且所述方法进一步包括对线性双链连接产物的扩增文库进行测序，其中所述测序的转化率为至少60％。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 鹍远基因公司 用于文库构建和序列分析的组合物和方法

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