申请/专利权人：花王株式会社

申请日：2019-01-11

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN111601892B

主分类号：C12N15/32

分类号：C12N15/32;C12N1/21;C12N15/75;C12P21/02

优先权：["20180112 JP 2018-003491"]

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2020.09.22#实质审查的生效;2020.08.28#公开

摘要：本发明提供一种用于在芽孢杆菌属细菌的菌体内高生产Cry蛋白质的方法。一种Cry蛋白质或含有该Cry蛋白质的培养产物的制造方法，包括：用将编码Cry蛋白质的基因与包含σA依赖性启动子或σH依赖性启动子的控制区域能够工作地连接并嵌入而成的表达质粒来转化芽孢杆菌属细菌，培养该转化细胞，其中，上述表达质粒是包含编码由序列编号9所示的氨基酸序列构成的复制蛋白质、或在氨基酸序列上与其具有80％以上的同一性并且参与复制起始的蛋白质的多核苷酸的质粒。

主权项：1.一种在菌体内生产的Cry蛋白质或含有该Cry蛋白质的培养产物的制造方法，其中，所述方法包括：用将编码Cry蛋白质的基因与包含σA依赖性启动子或σH依赖性启动子的控制区域能够工作地连接并嵌入而成的表达质粒来转化枯草杆菌，培养该转化细胞，所述表达质粒是包含编码由序列编号9所示的氨基酸序列构成的复制蛋白质、或在氨基酸序列上与其具有90％以上的同一性并且在质粒的复制起始发挥作用的蛋白质的多核苷酸的质粒，所述枯草杆菌为选自以下1～4中的任意菌株：1具有缺失了prophage6区域、prophage1区域、prophage4区域、PBSX区域、prophage5区域、prophage3区域、spb区域、pks区域、skin区域、pps区域、prophage2区域、ydcL-ydeK-ydhU区域、yisB-yitD区域、yunA-yurT区域、cgeE-ypmQ区域、yeeK-yesX区域、pdp-rocR区域、ycxB-sipU区域、prophage7区域、sbo-ywhH区域、yybP-yyaJ区域和yncM-fosB区域中的全部区域的基因组的枯草杆菌株；2缺失了aprX、aprE、nprB、nprE、bpr、vpr、mpr、epr和wprA中的全部基因或使其失活了的枯草杆菌株；3缺失了选自sigE和sigF的基因或使其失活了的枯草杆菌株；4对枯草杆菌MGB874株以恒定表达abrB基因或与其相当的基因的方式进行基因构建并且kinA基因缺失或失活的枯草杆菌突变株。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 花王株式会社 蛋白质的制造方法

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