申请/专利权人:华中农业大学
申请日:2022-07-22
公开(公告)日:2024-03-19
公开(公告)号:CN115161275B
主分类号:C12N5/0775
分类号:C12N5/0775
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.03.19#授权;2022.10.28#实质审查的生效;2022.10.11#公开
摘要:本发明公开了一种牛脱细胞真皮基质微球,它是将牛真皮进行脱细胞处理后,用胃蛋白酶消化为溶液状态,然后使用乳化交联法制备而成。本发明提供的微球具有较大的表面积和立体的三维结构,易于细胞粘附,能为细胞提供丰富的胞外基质环境,有利于细胞的存活和增殖。试验结果还表明,该微球能提高骨髓间充质干细胞干性相关基因如OCT4和SOX2的表达,促进细胞因子如TGF‑β、EGF、TSG‑6和VEGF的分泌,从而能增强细胞的分化潜能和免疫调节功能,提高其临床应用效果。
主权项:1.一种牛脱细胞真皮基质微球,其特征在于,制备方法包括以下步骤:(1)将牛皮去除表皮和脂肪组织后切成牛真皮小块,将牛真皮小块依次加入到碳酸钠溶液、NaCl溶液、SDS溶液中进行搅拌脱细胞处理,用水洗净后得到牛脱细胞真皮基质,然后将其冻干,粉碎,得到牛脱细胞真皮基质粉末;(2)将牛脱细胞真皮基质粉末置于含有胃蛋白酶的乙酸溶液中消化24-48h,离心取上清液,用NaOH调节上清液pH至中性,得可溶性牛脱细胞真皮基质溶液;(3)将乳化剂span-80和矿物油液体石蜡混匀形成油相,将可溶性牛脱细胞真皮基质溶液加入到油相中,搅拌形成乳液,然后向乳液中加入戊二醛使可溶性牛脱细胞真皮基质固化,最后向乳液中加入异丙醇使乳液分层,离心取沉淀,依次用丙酮、异丙醇和超纯水清洗,置于PBS中浸泡过夜,去除PBS后即得到牛脱细胞真皮基质微球。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 华中农业大学 一种牛脱细胞真皮基质微球及其在细胞三维培养中的应用
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