申请/专利权人：浙江工业大学

申请日：2023-12-12

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117737151A

主分类号：C12P17/12

分类号：C12P17/12;C12N9/06;C12N15/53;C12N9/02;C12N1/21;C12R1/19

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.03.22#公开

摘要：本发明公开了一种生物合成5‑氨基‑6‑氯喹啉的方法及卤化酶突变体，所述卤化酶突变体是将SEQIDNO.2所示卤化酶的氨基酸序列的第112位进行单突变获得的。本发明采用微白伦茨氏菌卤化酶作为催化剂生物催化合成5‑氨基‑6‑氯喹啉的方法，底物和酶“一锅法”反应，直接得到终产物5‑氨基‑6‑氯喹啉，工业成本低；初始原料为5‑氨基喹啉，价格便宜；同时所需的微白伦茨氏菌卤化酶作为催化剂，可通过构建大肠杆菌基因工程菌，然后通过发酵大量制备，相对易得和廉价。本发明所提供的活力提高的卤化酶突变体，与野生型相比较，酶活力提升20％，达到218Ug，反应24小时后产物积累量提高20％，达到92.3％。

主权项：1.一种生物合成5-氨基-6-氯喹啉的方法，其特征在于，所述方法为：以含卤化酶编码基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体或湿菌体超声破碎后的粗酶液为催化剂，以5-氨基喹啉为底物，以NADH、FAD为辅因子，以黄素还原酶Fre为辅酶，以氯化钠为氯离子供体，以pH7.0～8.0的缓冲液为反应介质构成反应体系，在温度20～45℃、转速500-1200rpm条件下进行转化反应，反应结束后，将反应液分离纯化，获得5-氨基-6-氯喹啉。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江工业大学 一种生物合成5-氨基-6-氯喹啉的方法及卤化酶突变体

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