申请/专利权人：上海腾瑞制药股份有限公司

申请日：2023-04-14

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN116875657B

主分类号：C12Q1/37

分类号：C12Q1/37;G01N21/31

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.22#授权;2023.10.31#实质审查的生效;2023.10.13#公开

摘要：本发明公开了一种重组巴曲酶的糖蛋白定量分析方法，通过选择合适的溶解缓冲液，保证检测标准品以及检测样品的良好的线性关系，利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，通过比色建立标准曲线来测定样品中糖蛋白的含量。重复性实验表明，采用所述溶液对于不同浓度的重组巴曲酶均具有较好的重复性。通过对样品中的巴曲酶进行定量分析，测定结果与市面上常用的测定糖蛋白的试剂盒结果近似，表明本发明的方法具有较高的准确性。

主权项：1.一种重组巴曲酶的糖蛋白定量分析方法，其特征在于，包括如下步骤：1标准品溶液的制备，将D-甘露糖用溶液按比例稀释相应的倍数浓度；2待测样品溶液的制备，取毕赤酵母重组表达的巴曲酶浓缩原液，用相应的溶液进行稀释；3加酚类物质和硫酸：分别取标准品溶液或待测样品溶液200μL，加入6％酚类物质溶液100μL涡旋混合，快速加入浓硫酸500μL，混匀后，离心，置室温下40min，冰浴终止反应；4酶标仪读板：分别吸取样品反应溶液各200μL至96孔板，双复孔平行上样，用酶标仪读取515nm波长ODA值；5根据测定的OD值，建立标准曲线，应用计算机软件进行读数和数据分析;步骤1和步骤2中采用的溶液为20mMPBS+0.15MNaCl,所述溶液的pH值为6.0;所述酚类物质为苯酚。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海腾瑞制药股份有限公司 一种重组巴曲酶的糖蛋白的定量分析方法

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