申请/专利权人：青岛海尔生物科技有限公司

申请日：2024-01-26

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN117802040A

主分类号：C12N5/0783

分类号：C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.19#实质审查的生效;2024.04.02#公开

摘要：本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种靶向NY‑ESO‑1抗原富含Tscm和Tcm表型的CTL细胞的制备方法与应用。该制备方法最大优势就是在培养初期中，能够通过加入一定量的重组人纤粘连蛋白使其非特异扩增细胞并维持初始CD8+T细胞的表型，使HumanHLA‑A*02:01B2MNY‑ESO‑1SLLMWITQC四聚体蛋白能够持续向更多的初始CD8+T细胞提供抗原信号，进一步提高诱导效率。体外培养14天后，该方法制备的NY‑ESO‑1特异性CTL细胞占比不低于90％，细胞整体扩增倍数达到600倍以上。

主权项：1.一种靶向NY-ESO-1抗原富含Tscm和Tcm表型的CTL细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1第0天，采集HLA-A*02:01阳性健康供者外周血，分离出初始的CD8+T细胞，将CD8+T细胞接种至X-vivoTM15培养基中，所述CD8+T细胞的初始接种密度为0.8～1.2×106个mL，所述X-vivoTM15培养基中含有体积分数10％AB血清、2～4μgmLHumanHLA-A*02:01B2MNY-ESO-1SLLMWITQC四聚体蛋白、0.6～1.3μgmL抗人CD28抗体、2～6μgmL重组人纤粘连蛋白、30～70ngmLIL-2、2.5～7.5ngmLIL-7、1～4ngmLIL-15、3～7ngmLTGF-β；2第2天，采用X-vivoTM15培养基进行等量全量换液，所述X-vivoTM15培养基中含有体积分数10％AB血清、30～70ngmLIL-2、2.5～7.5ngmLIL-7、1～4ngmLIL-15、3～7ngmLTGF-β；3第2天之后，采用X-vivoTM15培养基根据细胞密度补液，使得细胞密度维持在0.8～1.2×106个mL；所述X-vivoTM15培养基中含有体积分数10％AB血清、30～70ngmLIL-2、2.5～7.5ngmLIL-7、1～4ngmLIL-15、3～7ngmLTGF-β；4培养至12～15天，收集细胞，得到靶向NY-ESO-1抗原富含Tscm和Tcm表型的CTL细胞。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 青岛海尔生物科技有限公司 一种靶向NY-ESO-1抗原富含Tscm和Tcm表型的CTL细胞的制备方法与应用

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