申请/专利权人:西安天隆科技有限公司
申请日:2023-12-28
公开(公告)日:2024-04-02
公开(公告)号:CN117802135A
主分类号:C12N15/70
分类号:C12N15/70;C12N15/12;C07K14/47;C07K1/22;C07K1/18;C07K1/20;C12N1/21;C12R1/19
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.19#实质审查的生效;2024.04.02#公开
摘要:本发明属于基因工程技术领域,公开了一种人源RNA酶抑制剂的制备工艺,所述制备工艺使用优化的表达载体、表达宿主及培养基的优化组合,无需采用融合蛋白标签,表达的RI的产量均值可达22.106mgL,目标蛋白活力均值可达1768495UL,纯度大于95%,其效果比现有技术采用了可溶性标签的产量和比活更高,产量提升了约20倍,同时避免了加减标签和包涵体复性的繁复操作和其中产生的活性丧失,缩短生产周期,节约生产成本,应用前景优良。
主权项:1.一种人源RNA酶抑制剂的制备工艺,其特征在于,包括如下步骤:步骤S1:构建重组表达载体:将如SEQIDNO.1所示的RI基因连接于大肠杆菌质粒上得到重组表达载体;步骤S2:培养表达,将所述大肠杆菌质粒转化至大肠杆菌蛋白表达感受态细胞中,涂布于具有抗生素的筛选平板,37℃培养16-24h,获得阳性克隆;再挑取来自所述阳性克隆的单克隆依次经过生长培养基、诱导培养基进行诱导表达,获得培养菌体;步骤S3:破菌,并分离纯化获得目的蛋白。
全文数据:
权利要求:
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