申请/专利权人：江西省林业科学院

申请日：2024-02-22

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN117802030A

主分类号：C12N5/04

分类号：C12N5/04;C12Q1/6869

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.19#实质审查的生效;2024.04.02#公开

摘要：本发明提供了闽楠原生质体的制备方法及其在单细胞测序中的应用；本发明通过筛选得到了闽楠原生质体最佳制备方法，包括酶解液的组成、酶解时间及纯化时离心的条件等；同时本发明提供的方法制备的闽楠原生质体复合单细胞测序的条件，能够进行单细胞测序；本发明通过单细胞测序构建了闽楠原生质体的细胞图谱，可为樟科及其他木本植物分化发育研究提供全新的见解、思路；本发明提供的闽楠原生质体制备方法，改善了目前珍稀树木尚未公开原生质体制备方法的问题。

主权项：1.一种可用于单细胞测序的闽楠原生质体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：使用酶解液酶解闽楠1-2月幼茎研磨液，制得闽楠原生质体粗液；所述酶解液包括0.5-0.7molL甘露醇、1-2％纤维素R-10、1-2％离析酶R-10；所述酶解时间为3-12h；将原生质体粗液过筛，并加入WB液，重悬并进行第一次离心；第一次离心完成后，弃上清，加入WB液，再重悬并进行第二次离心；第二次离心完成后，弃上清，加入WB液；重复所述第一次离心的步骤和第二次离心的步骤；最后一次离心完成后，弃上清液，加入WB液混匀，制得闽楠原生质体悬液。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江西省林业科学院 闽楠原生质体的制备方法及其在单细胞测序中的应用

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