申请/专利权人:华东理工大学
申请日:2022-11-18
公开(公告)日:2024-04-02
公开(公告)号:CN116064630B
主分类号:C12N15/70
分类号:C12N15/70;C12N9/22
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.02#授权;2023.05.23#实质审查的生效;2023.05.05#公开
摘要:本发明公开了一种基于Cas蛋白酰基化修饰工程改进CRISPR基因编辑效率的方法,属于生物技术领域。上述方法是通过调节Cas蛋白的细胞内酰基化水平并通过对酰基化位点进行理性改造,获得活性高且不受细胞内环境影响的Cas蛋白,提高对目标基因的编辑效率。本发明通过实验验证了体外Cas9蛋白的乙酰化对dsDNA切割功能的影响,证实了体内小分子代谢物导致的乙酰化修饰改变了Cas9的切割活性。同时,发现在体内Cas9蛋白乙酰化改变了Cas9的切割活性。此外,通过对Cas9蛋白进行模拟突变,获得了活性较高的Cas9蛋白突变体,从而获得了高效的基因编辑工具,为理性挖掘新的改造位点提供了新的思路。
主权项:1.一种基于Cas蛋白酰基化修饰工程改进CRISPR基因编辑效率的方法,其特征在于,通过对SpyCas9蛋白的第1097位由赖氨酸突变为精氨酸,提高对目标基因的编辑效率。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 华东理工大学 一种基于Cas蛋白酰基化修饰工程改进CRISPR基因编辑效率的方法
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