申请/专利权人：长春长光辰英生物科学仪器有限公司

申请日：2021-03-13

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN113029919B

主分类号：G01N15/14

分类号：G01N15/14;G01N15/1433;G01N21/64;G01N1/28;G01N1/30

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.02#授权;2021.07.13#实质审查的生效;2021.06.25#公开

摘要：本发明一种细胞富集与荧光计数的检测装置以及检测、计数方法，包括：磁力富集模块、荧光激发模块、荧光探测成像模块、样品腔、位移模块、计算机、流体模块、EP管以及储液瓶；采用富集磁力与荧光技术集成的结构设计，通过优化的高度浓度与低浓度的不同检测方式，结合科学的计数方法，有效的提高了细胞的检测与计数效率，大大降低了中间转移其他操作环节有可能造成的人为误差；本发明人工参与环节少，集成化程度高，有效的提高了细胞检测与计数精度低的不足；通过一体化的流程，一次性完成细胞的富集磁化、染色、筛选、废液收集、检测与计数各个环节，大大提高了细胞检测与计数的工作效率效率。

主权项：1.一种细胞富集与荧光计数的检测装置，其特征在于，包括：磁力富集模块、荧光激发模块、荧光探测成像模块、样品腔、位移模块、计算机、流体模块、EP管以及储液瓶；所述磁力富集模块用于产生磁力场，使得样品腔中的待测样品通过其内的目标物与磁珠结合后，在磁力场的作用下产生一侧吸附效应；所述荧光激发模块用于对染色后的目标物进行荧光激发，并产生荧光；所述荧光探测成像模块用于对探测到的荧光进行接收，并生成荧光图像；所述样品腔设置于所述磁力富集模块的磁力场中，用于盛放待测样品；所述位移模块用于搭载所述荧光探测成像模块，对所述样品腔的腔壁进行平面扫描；所述计算机用于对所述荧光图像进行算法处理，从而实现样品计数；所述流体模块用于控制所述EP管内的待测样品流入样品腔，还用于控制所述样品腔内的废液流出，通过储液瓶收集废液；所述样品计数的具体步骤包括：步骤一、腔壁上荧光图像的覆盖面积大于一个成像视野，需对样品腔的腔壁进行平面扫描以完成完整的计数统计；步骤二、通过位移模块实现腔壁的平面扫描动作；所述位移模块的平面扫描动作，其运动路径计算如下：首先，设定单幅荧光图像的成像尺寸宽度为W，高度为H；其次，所述位移模块运动到样品腔的左上方扫描边缘时，记录运动系统坐标为（X0,Y0），所述位移模块运动到样品腔的右上方扫描边缘时，记录运动系统坐标为（X1，Y1），所述位移模块运动到样品腔的左下方扫描边缘时，记录运动系统坐标为（X2，Y2）；可计算得到从样品腔的左边缘到右边缘，所述位移模块需要移动最大次数N=（X1-X0）W，从样品腔的上边缘运动到下边缘，所述位移模块需要移动最大次数为M=（Y2-Y0）H；最后，由于样品腔扫描面积大，为保证全扫描行程内目标样品均可清晰成像，需要进行Z向对焦以获得高质量成像，使荧光计数准确，由于目标样品的浓度含量不确定，存在某些成像区域完全没有荧光可见的情况，使用传统的自动对焦无法完成计数操作，故而本发明采用定位补偿法进行对角补偿；所述定位补偿法包括：①设在（X0,Y0）位置，清晰成像的Z向位置为Z0；在（X1，Y1）位置，Z向清晰位置为ZX；在（X2，Y2）位置成像清晰位置为Zy；②当位移模块扫描到样品腔的第i行,1≤i≤N，第j列,1≤j≤M时，各运动轴的坐标为：X=X0+i*W;Y=Y0+j*H;Z=Z0+i*Zx-Z0N+j*Zy-Z0M；经过补偿计算后，即可实现全腔室范围清晰扫描成像；步骤三、位移模块扫描到样品腔腔壁的某一位置后，当前腔壁上的样品状态经由荧光探测成像模块传递到计算机内，经由图像处理算法进行荧光目标提取；将各个扫描面的荧光识别结果进行累计后，即为本次计数结果；所述样品腔的位置为平放或竖直放置；所述磁力富集模块、荧光激发模块、荧光探测成像模块与所述样品腔的角度位置保持一致，从而保证磁力富集模块与荧光激发模块生效，所述荧光探测成像模块能够正确成像。

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