申请/专利权人：杭州师范大学

申请日：2024-01-15

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117859702A

主分类号：A01K67/0271

分类号：A01K67/0271

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明涉及一种构建前列腺癌骨转移小鼠模型的方法。本发明通过将前列腺癌细胞经颈动脉注射后，进入血液循环系统，实验结果发现：癌细胞可扩散至全身，出现全身转移灶，重点趋向骨关节部位，能准确模拟人类前列腺癌骨转移的生物学特性。且该模型还应具有简单操作性，以确保在实验环境中的有效使用，从而提高前列腺癌骨转移的研究效率。

主权项：1.一种构建前列腺癌骨转移小鼠模型的方法，其特征在于：具体包括如下步骤：在感染前一天，将小鼠前列腺癌细胞接种于六孔培养板上；感染当天，首先，取出95μLDMEM培养基并置于1.5mLEP管中；然后，将pCDH-MSCV-MCS-EF1-copLuc-T2A-Puro病毒冰浴融化，然后吸取2.5μL病毒液以及2.5μL病毒助感染试剂到上述培养基中，配制成含病毒溶液的混合体系培养基；然后，消化前列腺癌细胞，离心，调整细胞密度，将沉淀细胞重悬于含病毒溶液的混合体系培养基，然后置于37℃培养箱中，继续培养30分钟；然后，将细胞重悬置于完全培养基，并将其放入培养箱中继续培养；在病毒感染24小时后，使用倒置显微镜观察荧光，以监测感染效率；待细胞生长情况稳定后，向转染细胞中添加浓度为0.1μLmL的嘌呤霉素逐渐升高嘌呤霉素浓度进行筛选，待细胞转染率高于80％时，得到含Luc荧光标记的前列腺癌细胞；然后，取Luc标记的处于对数生长期的前列腺癌细胞，用不含血清的基础培养基调整细胞浓度为5×106cellsmL；将0.1mL前列腺癌细胞悬液缓慢注入小鼠近心端颈动脉，建立前列腺癌骨转移小鼠模型。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 杭州师范大学 一种构建前列腺癌骨转移小鼠模型的方法

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