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【发明授权】用于操纵核酸的方法和组合物_生命技术公司_201880085159.4 

申请/专利权人:生命技术公司

申请日:2018-11-07

公开(公告)日:2024-04-12

公开(公告)号:CN111566223B

主分类号:C12Q1/6806

分类号:C12Q1/6806;C12Q1/6874

优先权:["20171107 US 62/582,597","20180816 US 62/719,078"]

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.04.12#授权;2020.10.20#实质审查的生效;2020.08.21#公开

摘要:本公开提供用于操纵核酸的方法、组合物和试剂盒以及系统,其包含使用预植入的固体载体实施对核酸模板的等温扩增,诸如重组酶‑聚合酶扩增recombinase‑polymeraseamplification;RPA。提供用于产生与固体载体结合的包括特定核苷酸序列的模板核酸分子的快速且有效的方法。此类方法可用于,例如操纵核酸来为利用单克隆核酸群体的分析方法做准备。

主权项:1.一种用于产生核酸模板的方法,其包括:a获得核酸分子群体,所述核酸分子群体中各分子包括在所述分子5'端处的第一连续核苷酸序列、在所述分子3'端处的第二连续核苷酸序列和位于所述第一连续核苷酸序列与所述第二连续核苷酸序列之间的第三连续核苷酸序列,其中所述第一连续核苷酸序列和所述第二连续核苷酸序列彼此不同,并且其中在所述群体中,所述核酸分子的所述第一连续核苷酸序列一致且所述核酸分子的所述第二连续核苷酸序列一致;b使所述核酸分子群体在正向引物和反向引物存在下经受核酸扩增循环以形成核酸产物,其中所述正向引物包括与所述第一连续核苷酸序列一致的寡核苷酸序列,且所述反向引物包括与所述第二连续核苷酸序列5'端的子序列互补的寡核苷酸序列,所述反向引物的寡核苷酸序列在所述子序列的3'端处与不和所述第二连续核苷酸序列互补的第四连续核苷酸序列连接;和c使b的所述扩增循环的核酸产物在所述正向引物和所述反向引物存在下经受扩增循环,以产生多种不同核酸产物;其中:所述反向引物包含与所述第二连续核苷酸序列的5'端互补的寡核苷酸序列但不含有与所述第二连续核苷酸序列的3'端互补的寡核苷酸序列,和所述核酸产物中的仅一种包括与所述第四连续核苷酸序列互补的核苷酸序列。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 生命技术公司 用于操纵核酸的方法和组合物

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