申请/专利权人：山西瑞亚力生物技术有限公司

申请日：2024-03-08

公开（公告）日：2024-04-30

公开（公告）号：CN117946970A

主分类号：C12N5/078

分类号：C12N5/078;C07K14/765;C07K1/30;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/14;C07K1/36

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.30#公开

摘要：本发明涉及一种高品质人血清纯化方法，包括血清的制备和白蛋白分离纯化，其中血清的制备过程中采用两次离心、两次过滤；血清白蛋白的分离纯化先用半饱和硫酸铵沉淀球蛋白，然后用盐析、层析法分离纯化，得到高品质人血清白蛋白，实现对人血清的纯化。本发明通过两次离心、两次过滤过的人血清品质高，为后期人血清白蛋白的分离纯化提供了保障。

主权项：1.一种高品质人血清纯化方法，包括血清的制备和白蛋白分离纯化，其特征在于，所述血清的制备包括以下步骤：S1.一次离心：取血液，4℃，3000-4000rpm条件下离心处理20min，得上清液；S2.二次离心：取步骤S1的上清液，4℃，8000rpm条件下离心处理3-5min，得上清液；S3.一次过滤：取步骤S2的上清液过0.22μm过滤器，得滤液；S4.二次过滤：取步骤S3的滤液过0.1μm过滤器，得滤液；S5.灭活：将步骤S4所得滤液进行病毒灭活，得到高品质血清；所述白蛋白分离纯化包括以下步骤：A.盐析：用50％饱和度的硫酸铵溶液沉淀血清中的球蛋白，4℃，4000rpm条件下离心处理15min，得上清液；调pH至4.5，加入饱和硫酸铵，4℃静置2h以上，然后4℃，4000rpm条件下离心处理15min，沉淀即为白蛋白初产物；B.除盐：将步骤A得到的沉淀用柠檬酸-Na2HPO4缓冲液溶解，透析至无NH4+；C.纯化：将步骤B脱盐后的样品，移液至DEAE-纤维素层析柱表面，待样品进入柱床后，先用0.06molL的醋酸铵缓冲液洗脱，摒弃该部分洗脱液，然后用0.3molL的醋酸铵缓冲液洗脱，收集流出的蛋白，得到纯化后的白蛋白。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山西瑞亚力生物技术有限公司 一种高品质人血清纯化方法

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