申请/专利权人：浙江万里学院

申请日：2021-11-26

公开（公告）日：2022-03-18

公开（公告）号：CN114196698A

主分类号：C12N15/82(20060101)

分类号：C12N15/82(20060101);C12N15/113(20100101);C12N15/55(20060101);C12N15/66(20060101);C12N15/65(20060101);A01H5/00(20180101);A01H6/88(20180101)

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2022.04.05#实质审查的生效;2022.03.18#公开

摘要：本发明公开了一种鄞红葡萄PEPCK基因敲除载体的构建方法，根据原始载体pAtU6‑26‑sgRNA‑35S‑EGFP‑Cas9序列和CRISPR‑Cas9基因编辑技术的设计原则设计插入位点，将目的片段插入原始载体的AtU6‑26启动子和gRNAscaffold之间，实现pAtU6‑26‑sgRNA‑35S‑EGFP‑Cas9‑PEPCK基因敲除载体的构建。本发明是一种基于CRISPR‑Cas9基因编辑技术的糖异生关键基因PEPCK敲除载体的构建方法，通过内源性的基因调控，能够通过反向遗传技术在鄞红葡萄的基础上进一步研究和培育不同风味的新品种提供技术支持，具有较高的应用价值。

主权项：1.鄞红葡萄PEPCK基因敲除载体的构建方法，其特征在于，根据原始载体pAtU6-26-sgRNA-35S-EGFP-Cas9序列和CRISPR-Cas9基因编辑技术的设计原则设计插入位点，将目的片段插入原始载体的AtU6-26启动子和gRNAscaffold之间，实现pAtU6-26-sgRNA-35S-EGFP-Cas9-PEPCK基因敲除载体的构建。

全文数据：

权利要求：

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