申请/专利权人:中国科学院精密测量科学与技术创新研究院
申请日:2021-11-04
公开(公告)日:2023-07-04
公开(公告)号:CN114231564B
主分类号:C12N15/864
分类号:C12N15/864;C12N15/62;C12N5/10;C12N15/65;C12N15/53
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.07.04#授权;2022.04.12#实质审查的生效;2022.03.25#公开
摘要:发明公开了一种rAAV载体核心质粒及其应用,所述rAAV载体核心质粒主要含有荧光蛋白基因和荧光素酶基因的双报告融合基因,特定AAV血清型Cap基因对应的识别性DNA序列。利用该rAAV载体核心质粒包装出的rAAV感染细胞,通过检测荧光蛋白或荧光素酶报告基因的表达,从而快速测定多种不同血清型rAAV的感染活性;此外,还可以通过对感染细胞中的特定AAV血清型Cap基因所对应的识别性DNA序列或其转录产物进行检测和丰度分析,用于同时评价多种不同血清型rAAV的感染效率差异。
主权项:1.一种rAAV载体核心质粒,其特征在于,所述rAAV载体核心质粒表达元件依次整合CMV启动子,荧光蛋白基因和荧光素酶基因的双报告融合基因,转录后调控序列WPRE,人生长激素polyA元件,以及插入在WPRE和polyA元件之间的AAV2或AAV9或AAV13血清型衣壳蛋白Cap基因所对应的识别性DNA序列,所述的AAV2血清型Cap基因的识别性DNA序列如SEQIDNo.3所示,AAV9血清型Cap基因的识别性DNA序列如SEQIDNo.4所示,AAV13血清型Cap基因的识别性DNA序列如SEQIDNo.5所示。
全文数据:
权利要求:
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