申请/专利权人:中国科学院分子植物科学卓越创新中心
申请日:2019-08-26
公开(公告)日:2024-01-05
公开(公告)号:CN112430560B
主分类号:C12N1/21
分类号:C12N1/21;C12P7/60;C12R1/01
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.01.05#授权;2022.07.01#实质审查的生效;2021.03.02#公开
摘要:本发明提供了一种构建2‑酮基‑L‑古龙酸生产菌株的方法,包括任意顺序的如下步骤中的一个以上:1中断塔特姆氏菌染色体中膜结合葡萄糖脱氢酶编码基因;2中断葡萄糖激酶编码基因;3中断葡萄糖酸激酶编码基因;4中断2‑酮醛糖还原酶编码基因和或其同工酶编码基因;5重组表达NADP+型葡萄糖脱氢酶;6重组表达NADPH型2,5‑二酮基‑D‑葡萄糖酸还原酶;7过表达2,5‑二酮基‑D‑葡萄糖酸内运蛋白ARU92990和ARU92994;8中断细胞染色体中PTS组分编码基因,得到基因工程菌。本发明构建的2‑酮基‑L‑古龙酸生产菌可以通过一步发酵法或全细胞催化以葡萄糖为原料生产2‑酮基‑L‑古龙酸,具有工业化开发前景。
主权项:1.一种构建2-酮基-L-古龙酸生产菌株的方法,所使用的原始宿主细胞为柠檬塔特姆氏菌,所述宿主细胞中包含葡萄糖酸脱氢酶和2-酮基-D-葡萄糖酸脱氢酶,该方法包括任意顺序的如下步骤:1敲除或缺失细胞染色体中膜结合葡萄糖脱氢酶编码基因;2敲除或缺失细胞染色体中葡萄糖激酶编码基因;3敲除或缺失细胞染色体中葡萄糖酸激酶编码基因;5在细胞中重组表达NADP+依赖型葡萄糖脱氢酶;6在细胞中重组表达NADPH型2,5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶;7在细胞中过表达2,5-二酮基-D-葡萄糖酸内运蛋白。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 一种2-酮基-L-古龙酸生产菌株及其构建方法
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