申请/专利权人:广州市金圻睿生物科技有限责任公司
申请日:2023-12-07
公开(公告)日:2024-03-08
公开(公告)号:CN117660440A
主分类号:C12N15/10
分类号:C12N15/10;C12Q1/6806;C40B50/06;C12Q1/6869
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.03.26#实质审查的生效;2024.03.08#公开
摘要:本发明公开了一种制备靶向测序文库方法及其应用。所述方法包括:将靶标DNA与建库混合物混合,获得PCR体系,进行PCR扩增,得到所述靶向测序文库;所述建库混合物包括扩增引物、接头引物、UDG酶、dNTPs和PCR酶;所述扩增引物与靶标DNA互补配对,包括上游引物和下游引物,所述上游引物和下游引物中至少一个的5’端含有UMI特异性标签,所述UMI特异性标签为随机序列。本发明开发防污染靶向测序文库制备方法,在PCR反应体系中加入UDG酶,在扩增引物上设计不同的UMI序列标签,能够避免气溶胶引起的实验污染,并监控可能的污染来源,为靶向测序的应用提供更为广阔的市场价值。
主权项:1.一种制备靶向测序文库方法,其特征在于,所述方法包括:将靶标DNA与建库混合物混合,获得PCR体系,进行PCR扩增,得到所述靶向测序文库;所述建库混合物包括扩增引物、接头引物、UDG酶、dNTPs和PCR酶;所述扩增引物与靶标DNA互补配对,包括上游引物和下游引物,所述上游引物和下游引物中至少一个的5’端含有UMI特异性标签,所述UMI特异性标签为随机序列。
全文数据:
权利要求:
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