申请/专利权人：四川省固体废物与化学品管理中心;成都大学;四川大学华西医院

申请日：2023-12-15

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN117701543A

主分类号：C12N9/86

分类号：C12N9/86;C12N11/10;C02F3/34;C02F101/38;C02F103/20

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.02#实质审查的生效;2024.03.15#公开

摘要：本发明公开了一种B家族内酰胺酶突变体及其固定化方法与应用，B家族内酰胺酶突变体序列如SEQIDNO：1‑5任一所述。用海藻酸钠对B家族内酰胺酶突变体进行固定化，并对固定化条件进行优化，发现该酶的最优固定化条件是：终浓度1.5％海藻酸钠，1.0％CaCl2，固定10min。以最优固定化条件固定B家族内酰胺酶突变体并对该酶进行酶学性质研究，发现该固定化酶的最适温度是30℃，最适pH是7.0。本发明发现B家族内酰胺酶突变体降解氨苄青霉素的去除率可以达到95％以上，具有广泛的应用前景。

主权项：1.一种B家族内酰胺酶突变体，其特征在于，其为下列任一突变体：突变体1，所述突变体1是在如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列基础上，将107位Thr突变为Met，113位Thr突变为Ala，141位Phe突变为Tyr，160位Val突变为leu；其氨基酸酸序列如SEQIDNO：2所示；突变体2，所述突变体2是在如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列基础上，将79位Leu突变为Val，84位Ala突变为Pro，148位Tyr突变为His；其氨基酸酸序列如SEQIDNO：3所示；突变体3，所述突变体3是在如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列基础上，将132位Leu突变为Val，138位Ala突变为Asp，139位Val突变为Leu，153位His突变为Gln，157位Asn突变为Ser，172位Cys突变为Trp；其氨基酸酸序列如SEQIDNO：4所示；突变体4，所述突变体4是在如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列基础上，将57位lle突变为Asn，79位Leu突变为Pro，107位Thr突变为Arg，108位Tyr突变为Cys，129位Leu突变为Val，158位Leu突变为Val，180位Thr突变为Ser，207位Ala突变为Gly；其氨基酸酸序列如SEQIDNO：5所示；突变体5，所述突变体5是在如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列基础上，将68位Ala突变为Ser，108位Tyr突变为Phe，192位Glu突变为Gln，213位Gly突变为Glu；其氨基酸酸序列如SEQIDNO：6所示。

全文数据：

权利要求：

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